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摘要目的：1.观察细菌脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）对大鼠外周血单核细胞组织因子（tissue factor，TF）和蛋白酶激活受体（protease activated receptors，PARs）的影响。2.观察血必净注射液对LPS刺激的大鼠外周血单核细胞分泌TF、白介素-6（interleukin-6，IL-6）、肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor，TNF）-α及表达PAR-1、PAR-2的影响。3.观察血必净注射液对脓毒症大鼠外周血单核细胞PAR-1、PAR-2和血浆TF、IL-6、TNF-α的影响。4.观察血必净注射液对脓毒症大鼠凝血功能及血小板（platelet，PLT）的影响。 方法：1.分离培养雄性Wistar大鼠外周血单核细胞，用LPS（1μg/ml）刺激，与活化蛋白C（activated protein C，APC）作对比，以终浓度为10mg/ml的血必净注射液干预不同时间（12、24、48及72h）后，用酶联免疫吸附试验（enzyme-linked immunoadsorbent assay，ELISA）检测细胞上清液TF、IL-6、TNF-α的含量，用流式细胞仪（flow cytometry，FCM）检测细胞表面PAR-1、PAR-2的表达。2.将LPS（1μg/ml）刺激的大鼠外周血单核细胞以1、10及100mg/ml不同终浓度的血必净注射液干预，培养24h后用ELISA检测细胞上清液TF、IL-6、TNF-α的含量，用FCM检测细胞表面PAR-1、PAR-2的表达。3.将104只大鼠按随机数字表分为4组：对照组、假手术组、CLP组和血必净治疗组，分别于手术后12、24、48及72h经腹主动脉取血，分离单核细胞，用FCM检测细胞表面PAR-1、PAR-2的表达，提取血浆，用ELISA检测TF、IL-6、TNF-α的含量，用实时荧光定量聚合酶链反应（real time-polymerase chain reaction，RT-PCR）检测外周血单个核细胞TF、IL-6mRNA的表达，并检测凝血酶原时间（prothrombin time，PT）、活化的部分凝血活酶时间（activated partial thromboplastin time，APTT）、纤维蛋白原（fibrinogen，FIB）及PLT的变化。 结果：1.体外实验中，LPS刺激的大鼠外周血单核细胞在刺激后24、48及72hPAR-1上调（P<0.01），在刺激后各时间点PAR-2也上调（P<0.05或P<0.01），细胞上清中TF、IL-6、TNF-α的含量在刺激后各时间点均增加（P<0.01）。LPS+APC组较LPS组在干预后24、48及72h PAR-1下调（P<0.01），在干预后24及48h PAR-2上调（P<0.01），在干预后各时间点TF、IL-6、TNF-α含量均减少（P<0.05或P<0.01）。LPS+血必净组较LPS组在干预后24、48及72h PAR-1下调（P<0.01），在干预后各时间点PAR-2上调（P<0.01），在干预后各时间点TF、IL-6、TNF-α含量均减少（P<0.05或P<0.01）。2.体外实验中，1、10及100mg/ml不同终浓度的血必净注射液干预组较LPS组PAR-1下调（P<0.01），细胞上清液TF、IL-6、TNF-α下降（P<0.05或P<0.01），以10mg/ml干预组最明显，仅10mg/ml干预组较LPS组PAR-2上调（P<0.01）。3.与对照组、假手术组相比CLP组大鼠外周血单核细胞PAR-1在手术后48及72h上调（P<0.05或P<0.01），PAR-2在手术后各时间点均上调（P<0.05或P<0.01）；TF在手术后24、48及72h增加（P<0.05或P<0.01），IL-6及TNF-α在手术后各时间点均增加（P<0.05或P<0.01），外周血单个核细胞TF、IL-6 mRNA的表达在手术后12、24及48h增加（P<0.05或P<0.01）；PT在手术后24、48及72h缩短（P<0.05或P<0.01），APTT在手术后12及48h延长（P<0.01），FIB在手术后12、24及48h降低（P<0.05或P<0.01），PLT在手术后12及24h降低（P<0.05或P<0.01）。与CLP组相比，血必净组PAR-1在手术后12及24h下调（P<0.05或P<0.01），PAR-2在手术后各时间点均上调（P<0.05或P<0.01）；TF在手术后24、48及72h下降（P<0.05或P<0.01），IL-6在手术后24及48h下降（P<0.01），TNF-α在手术后各时间点也下降（P<0.05或P<0.01），外周血单个核细胞TF mRNA在手术后12、24及48h下降（P<0.05或P<0.01），IL-6 mRNA在手术后各时间点也下降（P<0.05或P<0.01）；PT在手术后24及48h延长（P<0.05或P<0.01），APTT在手术后48h缩短（P<0.05），FIB在手术后12、24及48h增加（P<0.01），PLT在手术后24及48h增加（P<0.05或P<0.01）。 结论：1.血必净注射液可减少LPS刺激的大鼠单核细胞PAR-1、TF的表达，抑制IL-6、TNF-α的分泌，以10mg/ml的中等浓度在干预24及48h后最明显，并且此作用优于APC。2.血必净注射液可通过减少脓毒症大鼠单核细胞TF的分泌及下调其表面PAR-1而显著降低血浆IL-6、TNF-α水平，减轻炎症反应，改善凝血功能，验证了体外实验的结果。