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摘要Fas(CD95)是近年来发现的一个细胞膜分子,为Ⅰ型跨膜蛋白,属于TNF受体超家族,该分子的重要功能是接受特异的凋亡信号,针对Fas的单克隆抗体和Fas的生理配体FasL和Fas结合可以诱使表达Fas的细胞启动内源性凋亡程序使之不可逆的凋亡,构成了一条独立的特异的凋亡通路.这一独特的作用机制显示了治疗肿瘤的潜在意义.目前对耐药白血病细胞Fas的表达、调节和功能效应的了解尚很欠缺,这些问题的阐述对于运用Fas凋亡通路来克服耐药白血病是十分必要的,故该课题以人工诱导的以MDR和P170耐药机制的多药抗性急性髓性白血病细胞HL60R为对象,对上述问题进行了探讨.结果如下:一、运用间接免疫荧光和流式细胞仪分析证实于处于增殖期的HL60R高表达Fas,表达率为80.3%±3.3%.二、IFN-γ在50~1000U/ml浓度间均能在表达率和表达强度上向上调节HL60RFas的表达.在浓度为100U/ml时孵育24小时,HL60R的表达从80.3%±3.3%上调至91.4%±3.9%(P<0.01),并增强荧光强度.IL-2(100U-1000U/ml)单独不能上调Fas的表达率和荧光强度,但IL-2+IFN-γ进一步将表达率上调至96.4%±1.7%.三、Fas McAb能显著抑制HL60R增殖,经Fas McAb作用4小时,HL60R即出现胞体皱缩,胞膜出泡,核染色体凝结,DNA梯状(Ladder)等典型的凋亡特征,整个过程进展迅速,24小时内凋亡率90%以上,上述效应在Fas McAb浓度为0.25-2.0ug/ml之间呈现出明显的时间-剂量依赖效应.IFN-γ和IFN-γ+IL-2能显著增强上述效应并加速上述凋亡过程.四、HL60R的亲本细胞株HL60增殖生长期Fas表达率为78.6%±4.1%,Fas McAb对它的增殖抑制和诱导凋亡过程,IFN-γ对它Fas的表达上调和与Fas McAb的协同效应均与HL60R一致.以上结果表明多药耐药的HL60R和其非耐药的亲本细胞HL60Fas的表达、调节和效应保持一致.Fas的表达和功能与P170耐药机制相互独立,不受P170的影响,Fas可快速介导耐药HL60R细胞凋亡,IFN-γ能显著上调Fas的表达并增强HL60R对Fas McAb的敏感性从而与Fas McAb发生协同效应加速上述作用过程.显示Fas凋亡通路可作为克服肿瘤耐药的新途径.