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通络治痹汤对兔膝骨关节炎模型关节软骨及血清IL-1β、TNF-α含量影响的实验研究

摘要目的:通过对兔膝骨关节炎模型的动物实验研究,证实“通络治痹汤”对于KOA的治疗效果及其对KOA的作用机制,为临床应用通络治痹汤治疗膝骨关节炎提供数据支持。<br>  方法:<br>  选取40只健康新西兰兔,随机分为通络治痹汤组、藤黄健骨丸组、模型组、空白组,每组10只。除空白组外,其余各组采用改良Hulth法制各兔膝骨关节炎模型后,通络治痹汤组以通络治痹汤颗粒冲剂灌胃,藤黄健骨丸组以藤黄健骨丸溶解液灌胃,空白组、模型组以生理盐水灌胃,中药剂量的确定按陈奇《中药药理研究方法学(第二版)》中的方法,药物组分剂量按成人临床日用量5倍给药,以成人体重以60kg为标准,兔每日每公斤体重剂量为:(120ml/60kg)×兔体重(kg)计算。每天1次,持续灌胃8周。8周后于实验动物取材,标本处理后采用HE染色后光镜下观察软骨细胞结构及形态的变化,并行软骨Mankin's评分。对于血清用酶联免疫吸附法(ELISA法)检测血清中IL-1β、TNF-α含量的变化。<br>  结果:<br>  1.空白组关节软骨表面及关节边缘光整,颜色鲜活,无骨赘增生及软骨损坏;光镜下软骨细胞排列整齐,四层结构明显。模型组关节软骨损坏明显,软骨色泽变白,局部可见片状软骨脱落,关节边缘骨赘增生明显;光镜下软骨细胞减少,有细胞簇集现象,潮线紊乱消失。而通络治痹汤组与藤黄组无明显差别,软骨破坏程度及光镜下层次结构较模型组优,比空白组差。<br>  2.软骨Mankin's评分结果:通络治痹汤组及藤黄健骨丸组的评分积分明显低于模型组(P<0.05);通络治痹汤组、藤黄健骨丸组及模型组与空白组比较,前三者评分积分高(P<0.05)。<br>  3.ELISA法检测:①IL-1β含量:通络治痹汤组及藤黄健骨丸组血清中IL-1β含量明显低于模型组(*P<0.05);通络治痹汤组、藤黄健骨丸组及模型组高于空白对照组(#P<0.05)。②TNF-α含量:模型组血清TNF-α含量明显高于通络治痹汤组、藤黄健骨丸组及空白对照组(*P<0.05),差异有统计学意义;其中通络治痹汤组及藤黄健骨丸组血清TNF-α含量高于空白对照组(#P<0.05)。<br>  结论:<br>  1.改良Hulth法能成功模拟膝骨关节炎模型。<br>  2.炎性因子IL-1β及TNF-α通过诱导关节软骨细胞的损害而致膝骨关节炎发病。<br>  3.通络治痹汤能显著降低兔膝骨关节炎模型血清IL-1β及TNF-α含量,通过抑制IL-1β和TNF-α含量,延缓KOA病情进展,发挥其对KOA的治疗作用。

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