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摘要[目的]<br>　　心肌梗死（myocardial infarction，MI）后，干细胞移植可在一定程度上修复坏死的心肌，改善心功能。然而，缺血缺氧造成的微环境不利于干细胞的存活，并且通过静脉移植途径到达梗死部位的干细胞数量十分有限。冠心丹参方具有活血化瘀，理气止痛之功效，是临床治疗冠心病常用的中药。本研究通过冠心丹参方联合骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cell，BMSCs)移植治疗心肌梗死大鼠模型，以期通过中药冠心丹参方改善移植微环境，促进BMSCs向心机梗死部位迁移以及存活，提高干细胞移植修复坏死心肌的疗效，并探讨SDF-1/CXCR4轴在冠心丹参方调控干细胞移植治疗心肌梗死中的作用。<br>　　[方法]<br>　　对200g～220g的SD大鼠结扎左冠状动脉前降支建立心肌梗死模型。随机分为四组:模型组、BMSCs组、冠心丹参方组、BMSCs+冠心丹参方联合组。模型组给予生理盐水灌胃，BMSCs组给予尾静脉注射106个DiI标记的BMSCs，冠心丹参方组给予冠心丹参滴丸溶液灌胃，BMSCs+冠心丹参方联合组给予尾静脉注射106个DiI标记的BMSCs和冠心丹参滴丸溶液灌胃处理。治疗四周后，分别通过心脏超声检测心功能;Masson三色染色检测心肌梗死面积;cTnT和CD31免疫荧光染色观察移植于细胞的存活、迁移和分化;Western Blot检测SDF-1、p-Akt、YAP等蛋白的表达;通过TUNEL法检测细胞凋亡;经CD31免疫荧光染色统计各组血管密度。为进一步探讨冠心丹参方参与BMSCs移植治疗MI的可能的作用机制，在体外培养BMSCs，用不同浓度三七皂苷R1对BMSCs处理，CCK-8检测细胞的增殖;经300μmol/LH2O2处理建立体外氧化应激模型，观察不同浓度三七皂苷R1对BMSCs的保护作用;经Transwell小室迁移实验检测三七皂苷R1对BMSCs迁移的影响;经三七皂苷R1处理后，通过Western Blot检测CXCR4的表达，RT-PCR检测VEGF、bFGF、IGF-1等基因的表达。<br>　　[结果]<br>　　BMSCs静脉移植和冠心丹参方治疗均不能有效地提高EF和FS值，而BMSCs+冠心丹参方联合组能够明显恢复EF、FS值，并且高于BMSCs组和冠心丹参方组(P＜0.05)。Masson三色染色发现，BMSCs+冠心丹参方联合组能够减小心梗面积，作用优于BMSCs组和冠心丹参方组(P＜0.05)。荧光显微镜下可见BMSCs+冠心丹参方联合组心肌梗死部位BMSCs数量明显多于BMSCs组，并且可见极少量移植的BMSCs表达心肌细胞标志物cTnT，而BMSCs组中未观察到cTnT阳性的移植细胞。两组中均可见移植的细胞同时表达血管内皮细胞标志物CD31。Western blot检测发现，BMSCs移植或冠心丹参方灌胃均可上调SDF-1的表达，并且BMSCs+冠心丹参方联合治疗上调SDF-1表达的作用优于BMSCs组和冠心丹参方组(P＜0.05)。BMSCs移植后三天，BMSCs组和冠心丹参方组中的细胞凋亡数低于模型组(P＜0.05)，冠心丹参方组和BMSCs组中细胞凋亡数高于BMSCs+冠心丹参方联合组(P＜0.05)。心梗治疗后四周，各组间心肌细胞凋亡无差别(P＞0.05)。BMSCs组、冠心丹参方组和BMSCs+冠心丹参方联合组均能够上调p-Akt的水平。BMSCs组和冠心丹参方组中CD31阳性的血管数量高于模型组，BMSCs+冠心丹参方联合组中微血管密度明显高于BMSCs组和冠心丹参方组（P＜0.01）。Western blot检测YAP的表达发现，各组间无统计学差异(P＞0.05)。三七皂苷R1预处理48h、72h时能够促进BMSCs的增殖。三七皂苷R1与H2O2同时处理2h后，不同浓度三七皂苷R1组与H2O2组之间细胞活性无明显差异（P＞0.05）;而三七皂苷R1预处理24h可明显保护BMSCs对抗H2O2造成的损伤。Transwell小室迁移实验表明，0.1μM三七皂苷R1可提高BMSCs跨膜的迁移的数目(P＜0.05)，其他浓度三七皂苷R1对BMSCs迁移的影响不明显。在0.1μM三七皂苷R1基础上加入CXCR4抑制剂AMD3100后，BMSCs迁移数量明显下降。0.1μM三七皂苷R1可明显上调BMSCs中CXCR4的表达(P＜0.05)。PCR检测发现，0.1μM三七皂苷R1预处理后能够上调VEGF基因的表达(P＜0.01);不同浓度三七皂苷R1处理后，各组bFGF的表达无差异(P＞0.05);1μM和10μM三七皂苷R1处理可显著促进IGF-1的表达(P＜0.01)。<br>　　[结论]<br>　　冠心丹参方联合BMSCs移植能够改善心肌梗死大鼠模型心功能、减少梗死面积和细胞凋亡，提高静脉注射途径BMSCs向心肌梗死部位迁移以及向心肌和血管内皮细胞分化，并可促进梗死部位血管新生，从而改善缺血区的血液供应，促进心肌修复。SDF-1/CXCR4信号通路可能通过调控BMSCs向心肌梗死部位的迁移，参与冠心丹参方提高BMSCs移植治疗心肌梗死的作用。冠心丹参方联合BMSCs移植对YAP信号通路无明显影响。三七皂苷R1能够促进BMSCs的增殖，对抗BMSCs凋亡，通过上调CXCR4的表达增强BMSCs的迁移，三七皂苷R1还可以促进BMSCs中抗凋亡因子和促血管新生因子的表达。