换一批摘要目的 研究大黄酸抑制食管癌的作用机制.方法 从TCGA数据库下载食管癌和正常对照样本的全基因组表达矩阵.在符合无标度分布的基因网络中,具有相似表达模式的基因可以共同调节、功能相关或通路共享.采用WGCNA方法,构建疾病组和对照组各自的网络.细胞在100 mm培养皿中以60％～70％的汇合率进行转染.用si-DNMT3B或非靶向siRNA转染ECGI10细胞作为对照组.细胞转染后用Trizol试剂(Invitrogen,Carlsbad,CA,USA)从ESCA细胞系中提取的总RNA用RT试剂盒gDNA(TaKaRa)反向转录.使用SYBR Green(TaKaRa)和qRT PCR分析检测cDNA表达水平,并使用β-肌动蛋白作为内部参考.应用噻唑蓝比色法检测大黄素对食管癌细胞增殖的影响;用AnnexinV-FITC/碘化丙啶(PI)双染流式细胞术检测细胞凋亡情况;流式细胞术检测细胞内活性氧变化情况.结果 不同浓度大黄素可明显抑制EC-109细胞增殖,且具有浓度依赖性;在作用EC-109细胞2 h后,细胞内活性氧明显增;12 h后,可见细胞凋亡率分别为8.1％、15.6％、24.0％、36.5％.结论 大黄素能明显抑制EC-109细胞的增殖,通过诱导细胞内活性氧的产生,引起食管癌细胞EC-109凋亡.
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