瘦素受体长胞内段mRNA表达增加对骨骼肌细胞葡萄糖氧化的影响
Effect of increased leptin receptor long intracellular domain mRNA expression on glucose oxidation in skeletal muscle cells
目的研究原代骨骼肌细胞中瘦素受体长胞内段mRNA表达增加对葡萄糖氧化的影响.方法 RT-PCR扩增瘦素受体长胞内段cDNA,将扩增产物插入真核表达质粒,构建重组体.重组表达质粒经脂质体介导转染原代骨骼肌细胞,转染后48 h加瘦素和D-[U-14C]葡萄糖,收集14CO2,液体闪烁检测其放射性.另经RT-PCR半定量方法检测瘦素受体长胞内段mRNA在骨骼肌细胞的表达.结果扩增的瘦素受体长胞内段cDNA及其重组体在限制性内切酶酶切后所得各片段大小均与理论值一致.在重组表达质粒转染组、空表达质粒转染组和非转染组,前者特异性条带和β-actin条带积分光密度比值较后两者升高(均P<0.05);但3组细胞间葡萄糖氧化差异无显著性.结论成功构建含有瘦素受体长胞内段cDNA的重组真核表达质粒.单纯增加瘦素受体长胞内段mRNA表达不能改善瘦素对骨骼肌细胞的葡萄糖氧化作用.
更多- 浏览:158
- 被引:3
- 下载:0
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文