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miR-100基因敲除小鼠模型的构建及基因型鉴定

Construction and genotyping of miR-100 knockout mouse model

摘要:

目的 探讨miR-100基因敲除小鼠模型的构建及基因鉴定.方法 将引进的miR-100flox/flox小鼠与EIIa-Cre小鼠进行交配繁育出F1代小鼠,将F1代小鼠中基因型为miR-100flox/-的雌雄小鼠继续进行交配,获得F2代小鼠,待小鼠1周龄时剪尾部组织提取DNA,PCR法扩增目的基因片段,琼脂糖凝胶电泳进行基因型结果判定.结果 结果显示有所需要的miR-100基因敲除纯合子小鼠,将获得的敲除纯合子小鼠再交配,就可获得更多的基因敲除纯合子小鼠.F1代杂合子小鼠交配获得的F2代小鼠中出现3种基因型:miR-100flox/flox、miR-100flox/-、miR-100-/-,使用 PCR 法成功鉴定出了子代小鼠的基因型.同时剪取miR-100敲除纯合子小鼠、miR-100flox/flox小鼠及miR-100敲除杂合子小鼠的耳朵提取RNA,然后进行qRT-PCR验证miR-100的表达情况.qRT-PCR结果显示,miR-100基因全身敲除纯合子小鼠的耳朵中miR-100的表达几乎为零.结论 该实验成功配繁出miR-100基因全身敲除的小鼠模型,为后续实验提供基础.

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作者: 乔思源 [1] 江文刚 [1] 汪思应 [1]
期刊: 《安徽医科大学学报》2021年56卷4期 510-513页 ISTICPKU
分类号: R332Q78
栏目名称: 基础医学研究
DOI: 10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2021.04.002
发布时间: 2021-05-27
基金项目:
国家自然科学基金
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