牙龈卟啉单胞菌促进食管癌细胞NLRX1转位激活线粒体自噬的研究
Porphyromonas gingivalis promotes NLRX1 translocation to activate mitophagy in esophageal carcinoma cells
目的 探讨牙龈卟啉单胞菌(Pg)与食管癌细胞线粒体自噬的相关性,挖掘食管癌治疗新靶点.方法 ① 采用Western blot法检测Pg感染对食管癌细胞线粒体UNC-51-样自噬激活激酶1(ULK1)磷酸化影响,采用免疫组化法检测食管癌组织中Pg表达和ULK1磷酸化水平的相关性;② 利用Western blot、ICC、ELISA等方法检测Pg感染对食管癌细胞NOD样受体家族成员X1(NLRX1)由胞质向线粒体转位、线粒体自噬及白介素(IL)-6和活性氧(ROS)分泌水平的影响;③ 通过qPCR及RNAscope分别检测线粒体自噬抑制剂及ULK1抑制剂处理对C57小鼠食管组织中和食管鳞状上皮细胞中Pg定植情况的影响.结果 与未处理组相比,食管癌细胞经Pg感染后,其线粒体ULK1的磷酸化水平升高(P<0.01)、NLRX1表达升高(P<0.001)且自噬增强(P<0.001).动物实验结果表明,与对照组相比,联合干预组可抑制Pg在小鼠食管组织及食管鳞状上皮细胞中的定植(P<0.001).结论 Pg通过上调食管癌细胞线粒体ULK1磷酸化水平,从而促进NLRX1由细胞质向线粒体转位,进而诱导线粒体自噬,导致IL-6和ROS分泌减少,最终维持Pg定植.
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