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阻断Wnt/β-catenin信号通路对补肾活血中药作用后薄型子宫内膜干细胞标志物的影响

The Effect of Blocking Wnt/β-catenin Signaling Pathway on the Markers of Thin Endometrium Stem Cells After Treated by Bushen Huoxue Recipe

摘要:

目的 阻断Wnt/β-catenin信号通路对补肾活血中药作用后薄型子宫内膜干细胞标志物的影响.方法 选取薄型子宫内膜患者在确定排卵日后第7~9天,用一次性子宫内膜取样器吸取子宫内膜组织约100mg,处理固定.将取得的内膜组织分离培养子宫内膜干细胞.制备药物血清.将子宫内膜干细胞分为对照组、补肾活血中药高、中、低剂量组、西药组.予药物干预后,将转染T细胞因子(T-cell factor,TCF)的显性负性突变体(dominant negative TCF,dnTCF)表达质粒转染子宫内膜干细胞阻断Wnt/β-catenin信号通路,免疫荧光法检测CD34/CD117蛋白的表达、RT-PCR法检测Oct-4基因、Western blot法检测ABCG2蛋白的表达.结果 转染dnTCF-3阻断Wnt/β-catenin信号通路后,免疫荧光检测结果显示,CD34蛋白的阳性面积与总面积100%相比,中剂量组、高剂量组及西药组表达率较阻断前分别下降20.11%、25.78%、28.89%,差异具有统计学意义(P<0.05);CD117蛋白的阳性面积与总面积100%相比,中剂量组、高剂量组及西药组表达率较阻断前分别下降18.11%、24.78%、26.89%,差异具有统计学意义(P<0.05).RT-PCR检测结果显示,Oct-4 mRNA的表达率与总mRNA100%相比,高剂量组、西药组表达率较阻断前分别下降24.96%、24.84%.:Western blot检测结果显示,ABCG2蛋白的表达率与总蛋白100%相比,高剂量组、西药组表达率较阻断前分别下降15.06%、13.24%,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 补肾活血中药可能是通过作用于Wnt/β-catenin信号通路来作用于薄型子宫内膜干细胞的.

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