换一批
换一批噬菌体肽库在筛选及鉴定高转移性肝癌特异性结合肽中的应用及其意义
Application of phage-display peptide library in screening short peptides binding specifically to high metastatic potential hepatocellular carcinoma cells and its significance
摘要：
目的:探讨噬菌体环七肽库在筛选与肝癌高转移细胞株HCCLM3特异高效结合的短肽中的应用,为进一步探索肝癌转移的分子机制和寻找肝癌转移标志物奠定基础.方法:以人肝癌高转移细胞株HCCLM3为靶细胞、人肝癌低转移细胞株SMMC7721为吸附细胞对噬菌体环七肽库进行4轮差减筛选,采用ELISA方法进一步筛选出与HCCLM3细胞高度亲和的阳性克隆(即实验组A450nm值高于对照组3倍以上),并利用免疫细胞化学方法鉴定噬菌体阳性克隆的特异性并测序.结果:经过4轮陶筛后,噬菌体在筛选靶细胞上出现明显富集,且逐轮提高(P＜0.05);利用ELISA法对筛选后随机挑取的20个噬菌体克隆进行初步鉴定,得到6个能与肝癌细胞HCCLM3亲和度较高的阳性克隆(C4、C6、C7、C10、C11和C17);通过免疫细胞化学染色鉴定阳性克隆靶向肝癌细胞HCCLM3的特异性,与对照组比较,C7噬菌体对高转移潜能肿瘤细胞具有较高特异性(P＜0.05);测序显示6个阳性克隆氨基酸序列无同源性.结论:利用噬菌体环七肽库筛选得到与人肝癌高转移细胞株HCCLM3具有较高亲和力的多肽.
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作者：
作者单位：
北华大学附属医院消化内科,吉林吉林132011;吉林大学第一医院消化内科,吉林长春130021
[1]
吉林省吉林市中心医院普通外科,吉林吉林,132011
[2]
吉林大学第一医院消化内科,吉林长春,130021
[3]
期刊：
《吉林大学学报（医学版）》2014年40卷1期 87-91,后插3页
ISTICPKUCSCD
分类号：
R737.25
栏目名称：
基础研究
DOI：
10.7694/jldxyxb20140120
发布时间：
2015-09-18
基金项目：
吉林省科技厅科研基金资助课题
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