自噬对口腔鳞状细胞癌 CAL-27和 KB 细胞放疗敏感性的影响及其机制
Influence of antophagy in radiation sensitivities of oral squamous cell carcinoma CAL-27 and KB cells and its mechanisms
目的:利用自噬抑制剂联合放射疗法作用于口腔鳞状细胞癌 CAL-27和 KB 细胞,探讨自噬对口腔癌放射治疗敏感性的影响及其作用机制。方法:选择人口腔鳞状细胞癌 CAL-27和 KB 细胞,分为对照组、氯喹(CQ)组、3-甲基腺嘌呤(3-MA)组、放射组(IR 组)及联合放射组(CQ+ IR 组和3-MA+ IR 组)。应用MTT 法检测细胞生存率,采用免疫荧光法激光共聚焦显微镜观察 CAL-27细胞自噬水平(即 LC3Ⅱ免疫荧光强度),Western blotting 法检测自噬相关蛋白 LC3和 beclin-1表达水平,AnnexinV/PI 双染色流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果:与 IR 组比较,联合放射组细胞生存率明显降低(P <0.05)。IR 组细胞自噬水平明显高于对照组、CQ 组、3-MA 组和联合放射组(P <0.05)。IR 组 LC3和 beclin-1蛋白表达水平明显高于对照组和联合放射组(P <0.05)。与对照组比较,IR 组和联合放射组细胞凋亡率明显升高(P <0.05);与 IR 组比较,联合放射组细胞凋亡率也明显升高(P <0.05)。结论:放射疗法可以诱导口腔鳞状细胞癌细胞自噬水平升高。自噬抑制剂可以通过对口腔鳞状细胞癌细胞的增殖抑制及促凋亡作用,提高其对放射治疗的敏感性。
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