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没食子酸对人非小细胞肺癌A549细胞增殖的抑制作用

Inhibitory effect of gallic acid on proliferation of human non-small cell lung cancer A549 cells

摘要:

目的:探讨没食子酸对人非小细胞肺癌 A549细胞增殖的抑制作用,阐明其药物毒性的分子作用机制。方法:体外培养人非小细胞肺癌 A549细胞,将 A549细胞分为对照组及低、中和高剂量没食子酸组,没食子酸给药剂量分别为0、300、500和750μmol·L-1。MTT法检测各组细胞存活率,瑞氏-姬姆萨染色液检测各组A549细胞形态表现,流式细胞术检测细胞凋亡率和活性氧(ROS)水平,Western blotting法检测各组 A549细胞中 Fas和 FasL蛋白的表达水平;分光光度法检测各组 A549细胞中过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性。结果:与没食子酸处理6 h比较,处理12和24 h时各剂量没食子酸组 A549细胞存活率明显降低(P<0.05),随着作用时间延长,细胞存活率逐渐降低;没食子酸处理24 h后,与对照组比较,低、中和高剂量没食子酸组 A549细胞存活率明显降低(P<0.05)。瑞氏-姬姆萨染色,各剂量没食子酸组细胞出现胞质皱缩,细胞体积变小、变圆等凋亡形态表现;随着没食子酸剂量增加,A549细胞凋亡率逐渐增加;随着没食子酸剂量的增加,A549细胞中 Fas 和 FasL蛋白的表达水平有升高趋势,且 Fas与FasL蛋白表达水平呈正相关关系(r=0.92,P<0.05)。与对照组比较,低、中和高剂量没食子酸组A549细胞中 ROS水平升高(P<0.05);CAT活性升高,但组间比较差异无统计学意义(P>0.05),且 CAT活性随没食子酸剂量增加而逐渐降低。低剂量没食子酸组 A549细胞中 SOD活性明显高于对照组(P<0.05);中和高剂量没食子酸组 A549细胞中 SOD活性虽高于对照组,但组间比较差异无统计学意义(P>0.05),且 SOD活性随没食子酸剂量增加而逐渐降低。低剂量没食子酸组 A549细胞中 GSH-Px活性高于对照组,但组间比较差异无统计学意义(P>0.05);中和高剂量没食子酸组 A549细胞中 GSH-Px活性低于对照组,但组间比较差异亦无统计学意义(P>0.05);随着没食子酸剂量的不断增加,GSH-Px活性反而降低。低、中和高剂量没食子酸组间A549细胞中CAT、SOD和 GSH-Px活性比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:没食子酸可能是通过诱导氧化损伤的方式抑制肺癌细胞增殖,Fas/FasL信号通路可能是其诱导细胞凋亡的重要作用机制之一。

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