成体间充质干细胞内皮诱导方法的改进
A modified method of endothelial differentiation from adult mesenchymal stem cells
目的 对现有成体间充质干细胞(MSCs)内皮分化诱导方法 进行改进,以期找到更方便、更价廉并具有优良诱导效果的诱导方法.方法 取生长良好的P3代MSCs,分为3组.诱导1组:以含10%胎牛血清(FCS)、10 μg/L血管内皮生长因子(VEGF)、4 μg/L碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的低糖DMEM培养基进行内皮诱导14 d;诱导2组:以含10%FCS、20 μg/L VEGF、4 μg/L bFGF的低糖DMEM培养基进行内皮诱导14 d;对照组:以含10%FCS低糖DMEM培养基培养14 d,均于倒置相差显微镜下观察细胞形态及排列方式变化,免疫组化检测Ⅷ因子相关抗原表达,免疫荧光检测CD31表达,透射电子显微镜观察细胞内超微结构.结果培养14 d后,诱导1、2组细胞均变为扁平状,呈"铺路石"样排列,Ⅷ因子相关抗原及CD31均高度表达,阳性率均大于90%,透射电镜发现细胞内有W-P小体形成.而对照组细胞未发现此类改变.结论 联合使用低浓度VEGF及bFGF可使成体MSCs获得内皮系细胞的特征,是一种方便、价廉、有效的诱导方法.
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