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IL-24联合靶向减毒沙门菌载体SL7207/pBud-V P3对胃癌细胞的生长抑制作用

Inhibiting effect of IL-24 combined with targeting attenuated Salmonella vector SL 7207/pBud-Vp3 on growth of gastric cancer cells

摘要:

目的:探讨白细胞介素(IL)‐24联合靶向减毒沙门菌载体SL7207/pBud‐VP3对胃癌细胞生长的抑制作用及机制。方法构建 pBud‐VP3‐IL‐24真核双表达质粒,利用高压电穿孔法将pBud‐Vp3‐IL‐24质粒导入减毒沙门菌SL7207株中,构成SL7207/pBud‐VP3‐IL‐24菌株。建立小鼠胃癌移植瘤模型,将模型随机分为生理盐水对照组、SL7207/pBud组、SL7207/pBud‐VP3组及SL7207/pBud‐VP3‐IL‐24组,菌株口服饲喂荷瘤小鼠,测量肿瘤体积并计算抑瘤率。采用蛋白质印迹法检测肿瘤组织中IL‐24的表达;采用实时荧光定量‐PCR(RT‐PCR)检测干扰素‐γ(IFN‐γ)、IL‐6及肿瘤坏死因子‐α(TNF‐α)水平;采用免疫组织化学法测定半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶‐3(Caspase‐3)及血管内皮生长因子(VEGF)的表达。结果成功构建基于IL‐24的减毒沙门菌载体系统SL7207/pBud‐VP3‐IL‐24;治疗14 d后,胃癌组织可检测到IL‐24蛋白的表达;治疗28 d后,SL7207/pBud‐VP3‐IL‐24组与其他组比较,肿瘤体积缩小并能够明显抑制肿瘤生长,差异有统计学意义( P<0.05)。RT‐PCR及免疫组织化学显示,IL‐24联合SL7207/pBud‐VP3能够明显增加免疫因子IFN‐γ、IL‐6及TNF‐α的表达水平(P<0.05),上调Caspase‐3及下调VEGF的表达(P<0.05)。结论 IL‐24联合SL7207/pBud‐VP3可以协同发挥对胃癌细胞的生长抑制作用,其作用机制与肿瘤凋亡促进、肿瘤血管抑制、免疫调节等有关。

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