大鼠Hes1腺病毒表达载体构建及功能鉴定-论文-万方医学网

大鼠Hes1腺病毒表达载体构建及功能鉴定

Construction and functional identification of rat Hes1 adenovirus expression vector

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摘要：

目的构建高滴度大鼠Hes1腺病毒过表达载体(Ad-Hes1).方法以大鼠cDNA文库为模板,PCR法扩增Hes1,通过定向克隆构建pShuttle-CMV-Hes1穿梭质粒,再以pShuttle-CMV-Hes1为基础,构建pAdeno-Hes1病毒质粒,将pAdeno-Hes1转染293细胞,包装Ad-Hes1,利用改进TCID50法进行病毒滴度测定.Ad-Hes1感染H9c2心肌细胞,Western blot检测Hes1表达.结果 pShuttle-CMV-Hes1穿梭质粒、pAdeno-Hes1病毒质粒构建成功,总滴度为1.6×1011 PFU,Ad-Hes1可在H9c2心肌细胞内正常表达,其MOI值为30.结论 Ad-Hes1包装成功,为进一步研究Hes1的心肌保护作用奠定实验基础.

作者：周学亮 ^[1] 方义湖 ^[1] 赵勇 ^[1] 邹斌 ^[1] 徐华 ^[1] 刘季春 ^[1]

作者单位：南昌大学第一附属医院心脏大血管外科,江西南昌,330006 ^[1]

期刊：《重庆医学》2017年46卷5期 583-585页 MEDLINEISTIC

关键词：腺病毒科肌细胞,心脏 Hes1 质粒构建病毒包装 adenoviridae myocytes,cardiac Hes1 plasmid construction virus packaging

主题词：质粒(Plasmids)病毒(Viruses)大鼠(Rats)腺病毒科(Adenoviridae)肌细胞(Muscle Cells)

分类号： R511.8

栏目名称： 论著·基础研究

DOI： 10.3969/j.issn.1671-8348.2017.05.003

发布时间： 2017-04-10

基金项目：

国家自然科学基金资助项目 赣鄱555领军人才计划 江西省自然科学基金重大项目

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