大鼠肝胞液糖皮质激素受体的高效液相分析
The analysis of glucocorticoid receptor of rat liver with HPLC
目的:应用高效液相疏水作用层析法(HPHIC)分离并纯化大鼠肝胞液高、低亲和力糖皮质激素受体(GRH和GRL),为临床大剂量糖皮质激素(GC)冲击治疗提供实验依据.方法:超速离心大鼠肝组织,取上清,核素3H-地塞米松(Dex)标记后,分别行Pseudoscatchard分析及HPHIC分析,SDS-PAGE及Western 印迹法鉴定HPHIC分析后所收集的峰值管蛋白的性质.结果:在标准大气压,0~4℃条件下,只出现一个洗脱峰,峰值位置在9~11 min.而在标准大气压,25℃且3H-Dex ≥50 nmol/L时出现两个洗脱峰,峰值位置在3~7 min及9~11 min.SDS-PAGE及Western印迹法显示5~7 min和9~11 min时出现相对分子质量约60 000、可与GC单克隆抗体结合的蛋白质分子.结论:提示有两种不同大小的GR分子存在,但是否存在GRH 和GRL尚需进一步的实验证实.
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