丙型肝炎病毒核心蛋白基因的克隆及其高效表达
Cloning and expression of hepatitis C core protein gene
目的在大肠杆菌中表达丙型肝炎病毒(HCV)核心蛋白基因片段.方法利用PCR技术,扩增出357bp的HCV核心蛋白基因片段,双酶切后将其插入到原核表达载体pET-32a,构建重组表达质粒pET-32a/HCVc.转化到大肠杆菌BL21中,IPTG诱导表达.SDS-PAGE鉴定表达情况,Western blot鉴定表达产物的抗原性.结果经IPTG诱导后获得了目的蛋白的融合表达;SDS-PAGE电泳显示其在32 000处有一条融和表达条带;Western blot结果显示其具有HCV抗原特异性.结论HCV核心蛋白在大肠杆菌中获得高效表达,而且表达产物有良好的抗原性.
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