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HPC2真核表达载体的构建及其在HEK293细胞中的表达

Construction of eukaryotic expression vector for HPC2 and its expression in HEK293 cells

摘要:

目的构建在哺乳动物细胞中表达的HPC2真核表达载体,并分析其在HEK293细胞中的表达.方法从重组pcDNA3/HPC2载体上将HPC2 cDNA序列亚克隆至带有flag标记的真核表达载体pcDNA3-flag上,经PCR、酶切和测序鉴定,将重组质粒pcDNA3-flag/HPC2用脂质体瞬时转染HEK293细胞,细胞裂解后,用Western blot分析并观察HPC2在HEK293细胞中的表达情况.结果PCR、酶切和DNA测序结果均表明重组质粒pcDNA3-flag/HPC2构建正确,并可在HEK293细胞内高效表达.结论成功构建了pcDNA3-flag/HPC2真核表达载体,该载体能在哺乳动物细胞中有效表达,为进一步研究HPC2的功能提供了重要的实验材料.

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作者: 谭康联 [1] 李志杰 [2] 刘靖华 [2] 黄浩 [2] 唐靖 [2] 邓鹏 [2] 姜勇 [2]
期刊: 《第一军医大学学报》2005年25卷12期 1482-1484,1497页 MEDLINEISTICPKUCSCD
分类号: Q78
栏目名称: 论著·基础研究
DOI: 10.3321/j.issn:1673-4254.2005.12.004
发布时间: 2006-02-23
基金项目:
科技部科研项目 国家科技攻关项目
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