热休克蛋白70反义脱氧寡核苷酸对宫颈癌HeLa细胞生长和凋亡及化学治疗敏感性的影响

Effect of heat shock protein 70 antisense oligodeoxynucleotides on growth, apoptosis and chemosensitivity for human cervical cancer HeLa cells

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摘要目的:探讨反义脱氧寡核苷酸封闭HSP70基因对体外宫颈癌HeLa细胞增殖、凋亡及化疗敏感性的影响.方法:1)将体外培养的宫颈癌HeLa细胞分为正常对照组(Ctrl组)、反义寡核苷酸处理组(AS组)、正义寡核苷酸处理组(S组)、随机寡核苷酸处理组(R组),每组各5例,分别转染体外培养的宫颈癌HeLa细胞,采用Western免疫印迹检测各组细胞HSP70蛋白表达.2)将顺铂处理体外培养的宫颈癌HeLa细胞分为正常对照组(Ctrl组)、单纯顺铂处理组(Cis组)、反义寡核苷酸+顺铂处理组(AS +Cis组)、正义寡核苷酸+顺铂处理组(S+Cis组)、随机寡核苷酸+顺铂处理组(R +Cis组),每组各8例.采用四甲基偶氮唑蓝光吸收法(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法检测HeLa细胞的生长抑制率；流式细胞术检测HeLa细胞的凋亡率.结果:1)Ctrl组、AS组、S组、R组HSP70灰度比值分别为1.365±0.187,0.379±0.134,1.403±0.163和1.410±0.158,转染AS组HSP70灰度比值明显下降(P＜0.01)；2)AS+Cis组生长抑制率和凋亡率明显高于其它各组,差异有统计学意义(P＜0.05),S+Cis组和R+Cis组细胞生长抑制率和凋亡率与Cis组相比差异无统计学意义(P＞0.05).结论:HSP70反义脱氧寡核苷酸通过下调HeLa细胞中HSP70蛋白表达,抑制细胞增殖并诱导细胞凋亡.HSP70反义脱氧寡核苷酸与顺铂联合具有协同作用,能提高细胞对顺铂化学治疗的敏感性.