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烟雾提取物暴露对大鼠骨髓间充质干细胞凋亡的影响及其机制

Effects of smoke extract exposure on apoptosis of rat bone mesenchymal stem cells and its mechanism

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摘要目的:探讨烟雾提取物暴露对大鼠牙骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMMSC)凋亡的影响及其相关机制.方法:通过体外分离培养大鼠BMMSC并进行传代和鉴定,准备不同浓度的香烟烟雾提取物(cigarette smoke extract,CSE),分为0.5％低浓度CSE组、3.0％高浓度CSE组和空白对照组(无CSE组).采用TUNEL染色法和流式细胞检测法检测不同组细胞的凋亡情况,检测氧化损伤指标苯二醛(MDA)及氧自由基(ROS)变化,并测定细胞线粒体膜电位及细胞内游离Ca2+浓度.结果:0.5％低浓度CSE组和3.0％高浓度CSE组大鼠BMMSC细胞凋亡情况较空白对照组明显增多,且3.0％高浓度CSE组细胞凋亡率也高于0.5％低浓度CSE组.此外,CSE组大鼠BMMSC中MDA含量和ROS水平较空白对照组显著升高,且两者水平在3.0％高浓度CSE组也都高于0.5％低浓度CSE组,组间差异有统计学意义(P<0.05).0.5％低浓度和3.0％高浓度CSE组与空白对照组相比,大鼠BMMSC游离Ca2+浓度明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);与空白对照组相比,0.5％低浓度CSE组和3.0％高浓度CSE组大鼠BMMSC内线粒体膜电位明显降低,差异有统计学意义(P<0.05).结论:CSE能够促进大鼠BMMSC产生氧化自由基引起氧化损伤细胞膜和线粒体从而导致细胞凋亡.