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肿瘤坏死因子-α对人脐静脉内皮细胞中组织蛋白酶K表达的影响

Effect of tumor necrosis factor-αon cathepsin K expression in human umbilical vein endothelial cells

摘要:

目的:观察不同浓度肿瘤坏死因子-α( TNF-α)和不同TNF-α作用时间对人脐静脉内皮细胞( HUVEC )中组织蛋白酶K(Cat K)表达的影响。方法取对数生长期HUVEC进行实验。将HUVEC分为正常对照组、0.1 ng/ml TNF-α组、1 ng/ml TNF-α组、10 ng/ml TNF-α组、100 ng/ml TNF-α组,分别采用DMEM培养基、0.1 ng/ml TNF-α、1 ng/ml TNF-α、10 ng/ml TNF-α、100 ng/ml TNF-α作用24 h。另取HUVEC分为对照组、TNF-α6 h组、TNF-α12 h组、TNF-α24 h组、TNF-α48 h组,对照组DMEM培养基作用24 h,其他组采用10 ng/ml TNF-α作用相应时间。检测各组HUVEC 中的Cat K mRNA和蛋白的表达情况。结果与正常对照组比较,不同TNF-α浓度组的Cat K mRNA和Cat K蛋白表达水平均升高(P<0.05)。0.1 ng/ml TNF-α组、1 ng/ml TNF-α组、10 ng/ml TNF-α组 Cat K mRNA 和 Cat K 蛋白的表达水平依次增高(P<0.05),100 ng/ml TNF-α组Cat K mRNA和Cat K蛋白表达水平较10 ng/ml TNF-α组下降(P<0.05)。与对照组比较,TNF-α各作用时间组Cat K mRNA和Cat K蛋白的表达水平增高(P<0.05);TNF-α6 h组、TNF-α12 h组、TNF-α24 h组Cat K mRNA和Cat K蛋白的表达水平依次增高(P<0.05);TNF-α48 h组Cat K mRNA和Cat K蛋白的表达水平较TNF-α24 h组明显下降(P<0.05)。结论在一定作用浓度及作用时间内,TNF-α可以呈剂量和时间依赖性刺激HUVEC中Cat K表达。 TNF-α可能通过促进Cat K的表达促进动脉硬化的发生。

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