去甲肾上腺素对非酒精性脂肪肝大鼠自噬和凋亡的影响
The effects of norepinephrine on autophagy and apoptosis in the liver of rats with nonalcoholic fatty liver disease
目的 探讨去甲肾上腺素(NE)对非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠肝脏自噬和凋亡的影响.方法 将40只雄性SD大鼠随机分为4组:正常对照组、模型组、NE干预组(7 d)、NE干预组(14 d).采用高脂饮食法建立非酒精性脂肪肝动物模型,给予去甲肾上腺素腹腔注射,HE染色观察大鼠肝脏组织病理学变化;Western Blot方法检测微管蛋白1轻链3(LC3)-Ⅱ、LC3-Ⅰ蛋白表达的变化情况,计算LC3-Ⅱ/Ⅰ比值以评价自噬形成;利用免疫组织化学法检测4组肝组织凋亡酶激活因子(apoptotic protease activating facter-1,Apaf-1)表达水平;Real-time Q-PCR检测各组肝组织表达Apaf-1 mRNA的水平.结果 HE染色显示NAFLD大鼠模型成功建立,NE干预组肝脏病变程度较模型组加重;Western Blot检测模型组LC3-Ⅱ/Ⅰ比值较对照组明显升高(P<0.05),NE干预组LC3-Ⅱ/Ⅰ比值较模型组明显升高(P<0.05),NE干预组和14 d组差异无统计学意义(P>0.05);免疫组织化学法检测Apaf-1表达水平,发现模型组高于对照组(P<0.05),而NE干预组Apaf-1表达水平高于模型组(P<0.05),2治疗组之间差异无统计学意义(P>0.05);Real-time Q-PCR检测模型组Apaf-1mRNA表达水平高于对照组(P<0.05),而NE干预组Apaf-1mRNA表达水平高于模型组(P<0.05),2治疗组间差异无统计学意义(P>0.05).结论 NE能诱导非酒精性脂肪肝大鼠肝脏发生自噬体及凋亡小体,能提高Apaf-1蛋白及mRNA表达水平,LC3-Ⅱ/Ⅰ比值增高,可以作为非酒精性脂肪肝治疗的新靶点.
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