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人肝素酶基因正反义腺病毒表达载体的构建及鉴定

Construction and identification of sense and antisense human heparanase adenovirus expression vector

摘要:

目的:构建人肝素酶正义和反义腺病毒表达载体.方法:用EcoR I从pcDNA3-hpa质粒上切下约1.7kb的人肝素酶全长cDNA片段,然后连入pDC315质粒的EcoRI酶切位点上,经BamH Ⅰ酶切鉴定出正义和反义表达载体,并对正义重组质粒进一步采用测序鉴定其方向性.结果:经BamH Ⅰ酶切后,正义质粒形成4.3+1.4kb两条带,而反义重组质粒为5.1+0.4kb两条带,与理论计算值完全一致;测序结果与Gene Bank报告的肝素酶序列完全一致.结论:成功构建了人肝素酶的正、反义腺病毒表达载体,为进一步研究正、反义肝素酶基因转染对肿瘤细胞的影响奠定了基础.

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作者: 蔡永国 [1] 房殿春 [1] 杨仕明 [1] 罗元辉 [1] 杨孟华 [1] 王东旭 [1]
分类号: R3
栏目名称: 基础研究
DOI: 10.3969/j.issn.1009-3079.2004.02.020
发布时间: 2006-07-31
基金项目:
国家自然科学基金
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