换一批副溶血弧菌TaqMan双重实时-聚合酶链反应检测方法的建立
Establishment of Vibrio parahaemolyticus detection by duplex TaqMan real-time PCR assay
摘要目的 建立副溶血弧菌TaqMan实时-PCR和毒力基因TaqMan双重实时-PCR筛检的实验室检测方法.方法 根据副溶血弧菌toxR基因的保守序列设计引物和TaqMan探针,建立检测副溶血弧菌的实时-PCR方法;根据副溶血弧菌耐热直接溶血素(thermostable direct hemolysin,tdh)和耐热相关溶血素(thermostable related hemolysin,trh)基因的保守序列设计引物和探针,建立检测致病性副溶血弧菌毒力基因的双重TaqMan实时-PCR方法.对所建立的副溶血弧菌实时-PCR检测方法进行灵敏度和特异度评价.结果 副溶血弧菌的检测下限为102拷贝/μl,tdh和trh双重实时PCR的检测下限为102拷贝/μl.针对toxR基因建立的副溶血弧菌实时-PCR方法对11种其他弧菌和肠道细菌的染色体无扩增.结论 建立的方法能够特异和敏感地检测副溶血弧菌,并能确定致病性副溶血弧菌的毒力基因,能作为副溶血弧菌的灵敏和快速检测方法.
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DOI
10.3784/j.issn.1003-9961.2009.04.021
发布时间
2009-06-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家高技术研究发展计划（863计划）（2006AA02Z425）
国家自然科学基金（30872260）
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