抗河豚毒素单克隆抗体的制备及其抗毒效应
Preparation of monoclonal antibodies against tetrodotoxin and its anti-tetrodotoxin poisoning effect
目的:为制备高毒性的小分子生物毒素河豚毒素(TTX)的单克隆抗体(mAb),探讨TTX中毒免疫抗毒的可能性.方法:以TTX为半抗原,与中国鲎血蓝蛋白(TTH)化学偶联制备人工抗原(TTX-TTH);并以其免疫BALB/c小鼠.用杂交瘤技术制备抗TTX的mAb,用竞争抑制酶免疫分析法测定mAb对TTX结合活性,以mAb与检测抗原的结合被抑制50%时的TTX浓度(IC50)表示mAb的结合反应性.对小鼠预防注射抗体,测试抗体对抗TTX中毒的效果.结果:建立了2株对TTX-BSA阳性反应的mAb(1E4和3C11),均属IgG1亚类;具有TTX结合活性,其IC50值分别为3.2×10-6mol/L和9.9×10-7mol/L;亲和力常数(Kaff)分别为3.0×106 L/mol和2.8×106L/mol.小鼠预防给予mAbs,可对抗1×LD的TTX攻毒,动物存活率71%;抗1.5×LD时,1/3存活;抗毒效果好于小鼠抗血清对照.结论:用新的TTX人工抗原成功地制备了抗TTX的mAb,具有一定的体内预防抗毒效价.
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