换一批
换一批人重组阿片受体样受体在CHO细胞稳定表达系统的建立
Stable expression of human opioid receptor-like 1 in Chinese hamster ovary cells
摘要：
目的:在中国仓鼠卵巢(CHO)细胞上稳定转染人重组阿片受体样受体(hORL1),为体外高通量筛选hORL1受体作用药物及相关药物分子机制研究奠定基础.方法:用脂质体介导法将pcDNA3.1(+)-hORL1重组质粒稳定转染到缺乏hORL1的CHO细胞中,然后用含G418的选择性培养液进行筛选,挑取耐药克隆;用放射性配体-受体结合实验进一步筛选阳性克隆,对阳性克隆受体亲和力和表达量进行分析,用[35S]GTPγS结合实验分析表达受体的功能.结果与结论:在稳定转染hORL1的克隆细胞中,[3H]伤害感受肽的Kd和Bmax值分别为(0.44±0.21)nmol/L和(0.35±0.06)pmol/mg蛋白.伤害感受肽刺激受体结合[35S]GTPγS的EC50值为3.45 nmol/L.以上结果与文献报道的天然hORL1受体的特性相似,说明该细胞株表达的hORL1受体与天然的hORL1受体具有基本一致的生物学特性,证实成功建立了稳定表达人阿片受体样受体的细胞模型.
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作者：
作者单位：
军事医学科学院毒物药物研究所,北京,100850
[1]
期刊：
《军事医学科学院院刊》2009年33卷5期 409-411,485页
ISTIC
栏目名称：
论著
DOI：
10.3969/j.issn.1674-9960.2009.05.003
发布时间：
2009-12-18
基金项目：
军队"十一五"青年学者项目
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