换一批成年兔雪旺细胞体外培养增殖和纯化的实验研究
The Experimental Study of Purifying Cultured Schwann Cells from Adult Rabbit in Vitro
摘要目的 探讨从成年大白兔周围神经体外分离、纯化、培养的条件,观察雪旺细胞在体外存活、生长情况,目的 在于改进雪旺细胞的体外培养条件,寻找一种较好的获取雪旺细胞的方法.方法 利用成年兔发生Wallerian变性的双侧坐骨神经,剪碎至1 mm的植块,经改良后反复差速贴附法进行培养,应用b-FGF刺激SC增殖;采用相差显微镜下观察雪旺细胞状态计数和S-100细胞免疫组化染色相结合鉴定;绘制生长曲线,按照细胞倍增时间公式计算其倍增时间.结果 采用发生Wallerian变性后的兔双侧坐骨神经,经改良后差速贴壁培养方法能够明显抑制成纤维细胞的生长,但对雪旺细胞的生长影响较小,可获得大量高纯度的雪旺细胞,经S-100蛋白免疫组化鉴定,雪旺细胞纯度达94%以上,细胞数量达1×106/mL以上;绘制其生长曲线,并计算得出体外培养的第三代雪旺细胞体外倍增时间为3 d;一定浓度的b-FGF和NGF可促进雪旺细胞的增殖.结论 ①联合采用发生Wallerian变性后的神经、改良差速贴壁培养、b-FGF和NGF促进雪旺细胞增殖是一种较经济、简便、实用的方法,可获得较高纯度的雪旺细胞.②本培养方法能够获得大量高纯度的雪旺细胞,可作为周围神经组织工程实验研究的细胞来源.
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分类号
R-332（实验医学、医学实验）
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1000-2294.2008.01.007
发布时间
2008-05-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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