换一批
换一批siRNA沉默平滑肌细胞Cx43的表达及对细胞增殖的影响
Effects on Proliferation of VSMCs by Silencing the Cx43 Expression with siRNAs
摘要目的 通过siRNA介导的RNA干扰技术沉默平滑肌细胞缝隙连接蛋白Cx43的表达,观察其对平滑肌细胞增殖的影响.方法 应用阳离子脂质体转染的方法,将化学合成的特异性378siRNA转染平滑肌细胞设为特异性siRNA组,并以转染非特异性siRNA和空白作为对照,半定量RT-PCR法分析转染不同时间(24、48、72、96h)细胞Cx43 mRNA表达水平的变化;同时噻唑蓝(MTT)比色法检测平滑肌细胞增殖,观察转染不同浓度(50、100、150、200nmol/L)378siRNA对细胞增殖的影响.结果 半定量RT-PCR结果显示与非特异性siRNA组及空白对照组相比,转染特异性378siRNA后Cx43 mRNA表达水平显著地下调并呈时间依赖性特点.MTT结果显示与空白对照组相比,转染低浓度(50nmol/L)378siRNA早期(24、48h)OD值开始降低,但差异无统计学意义(P＞0.05),随着特异性siRNA 浓度的升高,OD值显著降低(P＜0.05).200nmol/L 378siRNA转染72、96h对细胞的增殖抑制率分别为32.51%、42.67%(P＜0.01),并呈浓度依赖性特点;而作为阴性对照的siRNA转染后则无上述作用.结论 转染特异性378siRNA可有效沉默平滑肌细胞缝隙连接Cx43mRNA 的表达并抑制平滑肌细胞的增殖.
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主题词
肌细胞, 平滑肌(Myocytes, Smooth Muscle)转染(Transfection)细胞增殖(Cell Proliferation)蛋白(Egg White)敏感性与特异性(Sensitivity and Specificity)
分类号
R-332
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1000-2294.2008.02.004
发布时间
2008-07-01
基金项目
国家自然科学基金（30360105）
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