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大鼠胚胎神经干细胞的分离培养及鉴定研究

Study of Cell Detachment, Cultivation and Identification of the Rat Embryo Neural Stem Cells in Vitro

摘要目的 探讨大鼠胚胎神经干细胞(NSCs)的分离、培养、分化及鉴定的条件与方法.方法 分离孕14~16 d SD大鼠胚胎脑皮质及皮质下区域NSCs,无血清培养基(DMEM/F12,含bFGF、EGF、B27等)条件下培养,通过有限稀释法克隆、传代,含血清培养基诱导分化,免疫组织化学法鉴定NSCs及诱导分化后的细胞.结果 体外培养的NSCs能稳定增殖成神经干细胞球并传代(nestin染色阳性),经诱导可分化为神经元细胞(NSE染色阳性)、星形胶质细胞(GFAP 染色阳性)和少突胶质细胞(CNP染色阳性).结论 采用无血清培养基中加入特定生长因子的培养技术,可在体外大量培养出稳定增殖并具有多向分化潜能的大鼠胚胎NSCs,为进一步研究NSCs的生物特性及应用奠定了基础.

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