换一批肼苯哒嗪对人乳腺癌细胞株MDA-MB-231雌激素受体α去甲基化的影响
The Effect of Demethylation by Hydralazine on Estrogen Receptor α of Negative Human Breast Cancer Cell Line
摘要目的 探讨肼苯哒嗪对雌激素受体(ER)α阴性人乳腺癌细胞株 MDA-MB-231 ERα基因启动子区CpG岛DNA甲基化的影响.方法 体外细胞培养,按药物浓度分为4组:分别用 0、5、10、20 μmol/L 的肼苯哒嗪作用 ERα阴性人乳腺癌细胞株 MDA-MB-231细胞96 h;按药物作用时间分为4组:分别于0、72、96、120 h 10 μmol/L肼苯哒嗪作用ERα阴性人乳腺癌细胞株 MDA-MB-231细胞,倒置光学显微镜下观察肼苯哒嗪对细胞生长的影响.各组提取 MDA-MB-231细胞总RNA,用 RT-PCR及图像分析检测肼苯哒嗪对MDA-MB-231 细胞ERα mRNA 表达的影响;提取 MDA-MB-231细胞基因组DNA,纯化、修饰后用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)检测乳腺癌细胞株MDA-MB-231 ERα基因启动子区CpG岛DNA甲基化状态.结果 与对照组比较,5、10、20 μmol/L 肼苯哒嗪组 ER/β-actin光密度积分值比值均明显升高(P＜0.05或P＜0.01);72、96、120 h 10 μmol/L肼苯哒嗪组ER /β-actin光密度积分值比值均明显升高(P＜0.05或P＜0.01).5 μmol/L肼苯哒嗪作用120 h 后ERα基因呈部分去甲基化状态,而经10 μmol/L肼苯哒嗪作用120 h后的ERα基因呈完全去甲基化状态.结论 肼苯哒嗪可以逆转ERα阴性人乳腺癌细胞株MDA-MB-231 ERα基因启动子区CpG岛DNA甲基化状态,使沉默基因重新表达.
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医学主题词
肼苯哒嗪(Hydralazine)细胞(Cells)甲基化(Methylation)雌激素受体α(Estrogen Receptor alpha)乳腺, 人(Mammary Glands, Human)
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1000-2294.2009.03.006
发布时间
2009-07-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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