ABCE1基因通过RNase L途径抑制人大细胞肺癌H460细胞凋亡
ABCE1 gene inhibit apoptosis of human large cell lung cancer H460 cells through RNase L pathway
目的:研究ABCE1基因表达对人大细胞肺癌H460细胞增殖、凋亡的影响并初步探讨其机制。方法体外培养H460细胞,分为A组(转染ABCE1-siRNA-1组)、B组(转染ABCE1-siRNA-2组)、C组(转染空质粒组)以及D组(空白对照组)。将构建好的ABCE1的siRNA(小干扰RNA)载体转染入培养的细胞中,荧光显微镜下观察转染效率,Western Blot法检测ABCE1蛋白以及RNase L蛋白的表达,RT-PCR法检测ABCE1 mRNA的表达,MTT法分析细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果将构建好的载体成功转入了H460细胞,转染后A、B组的细胞活性降低,ABCE1的表达受到阻断(P<0.01),RNase L蛋白含量明显增加(P<0.01),细胞的增殖能力明显降低并逐渐凋亡(P<0.01)。结论 ABCE1基因可促使人大细胞肺癌H460细胞增殖并抑制细胞凋亡,其机制是阻断了2-5A/RNase L细胞通路。
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