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四种细胞来源生物标志物在急性呼吸窘迫综合征大鼠中的变化特点

The changes of four cell-resource biomarkers in rats with acute respiratory distress syndrome

摘要:

目的 观察脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS)大鼠的肺表面活性蛋白B(surfactant proteins B,SP-B)、纤溶酶原活化抑制因子(plasminogen activator inhibitor-1,PAI-1)、高迁移率族蛋白B1(high-mobility group box B1,HMGB1)和可溶性晚期糖基化终产物受体(soluble receptor for advanced glycation end products,sRAGE)等四项生物标志物的早期变化特点,为临床联合检测提供依据.方法 实验在中山大学心肺脑复苏研究所完成,36只雄性SD大鼠随机(随机数字法)分成LPS组和对照组,每组18只;LPS组采用肺内注射LPS 10μg/mL诱导建立ARDS模型,对照组则肺内注射等量生理盐水,在造模后6h、12 h、24h留取血清、肺泡灌洗液及肺组织,每个时间点各6只大鼠,动脉血气及病理分析确认建模成功后用ELISA、免疫组化及Western blot检测SP-B、PAI-1、HMGB1和sRAGE的表达变化.采用成组f检验和重复测量的方差分析比较两组间各指标的差异.结果 LPS组PaO2(mmHg)随时间进行性降低,且与对照组比较差异有统计学意义(80.38±1.74 vs 84.17±1.96;72.20±1.70 vs 81.26±1.57;68.52±2.45 vs 81.45±1.51,P<0.05),HE染色提示肺损伤程度持续恶化.LPS组血清中HMGB1(ng/mL)(0.34±0.08,0.43±0.12,0.50±0.03),SP-B(ng/mL)(2.21±0.11,2.74±0.15,3.07±0.28)和PAI-1(ng/mL)(40.38±3.06,50.02±4.82,57.34±4.67)进行性升高,与对照组比较差异统计学意义(均P<0.05),但sRAGE(ng/mL)与对照组相比进行性下降(0.17±0.04,0.14±0.04,0.11 ±0.02),仅24 h与其他时点差异有统计学意义(P<0.05).LPS组肺泡灌洗液中HMGB1(ng/mL)(0.08±0.02, 0.13±0.02, 0.21±0.03)、PAI-1(ng/mL)(48.88±4.17, 56.66±4.01,65.83±4.96)和SP-B (ng/mL)(0.68±0.13,0.80±0.17, 1.12±0.14)进行性升高;而sRAGE (ng/mE)进行性下降(0.14±0.05,0.12±0.02,0.11±0.02),且与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05).免疫组化分析提示6h起PAI-1在肺间质逐步上调表达而HMGB1和SP-B则呈现肺泡内向肺实质扩散表达的趋势,但sRAGE则随时间呈下调表达趋势.Western blot提示SP-B、PAI-1和HMGB1表达量随时间升高,sRAGE表达量随时间逐渐降低.结论 ARDS早期病程中,SP-B、PAI-1和HMGB1在血清、支气管肺泡灌洗液及肺组织中呈一致性变化,选择其一或组合检测均可协助临床早期识别ARDS.

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作者: 林锦乐 [1] 史旻 [2] 卢彦秀 [3] 卫剑 [2] 傅萱 [2] 曾世永 [2] 叶剑滨 [2] 陶伍元 [1] 窦清理 [2] 张文武 [2]
作者单位: 深圳市宝安区人民医院急诊医学科 518101;南方医科大学第二临床学院广东省人民医院呼吸与危重症医学科,广州510515 [1] 深圳市宝安区人民医院急诊医学科 518101 [2] 广东医科大学研究生学院,湛江524000 [3]
期刊: 《中华急诊医学杂志》2020年29卷11期 1417-1424页 ISTICPKUCSCDCA
栏目名称: 基础研究|%Experimental Medicine
DOI: 10.3760/cma.j.issn.1671-0282.2020.11.007
发布时间: 2020-12-16
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