实时定量RT-PCR检测肝癌miRNA表达中内参的选择
Selection of optimal internal controls for miRNA expression in human hepatocellular carcinoma using real-time quantitative RT-PCR
摘要目的 探讨肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织采用实时定量RT-PCR(RT-qPCR)技术检测miRNA表达最佳内参的选择.方法 采用实时RT-qPCR技术检测7个内参RNU6B、RNU48、RNU66、RNU44、RNU43、5s rRNA和18s rRNA在70例HCC及相应癌旁肝组织中的表达.并使用NormFinder及geNorm软件分析最优化的内参.结果 7个内参表达结果存在差异.NormFinder及geNorm软件均显示RNU6B+RNU48组合为肝组织的最佳内参.结论 使用实时定量RT-qPCR研究目标miRNA相对定量表达时,为保证数据的精确性和客观性,在实验前对内参进行慎重的筛选是必不可少的.NormFinder及geNorm软件可用于各种实验因素下适宜内参的选择.
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