近红外七甲川花菁染料IR-80染色鉴别乳腺良恶性细胞

Identification of breast cancer cells from benign breast cells with a NIR fluorescence dye IR-80

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摘要目的观察乳腺上皮细胞株和乳腺癌细胞株通过近红外(near-infrared,NIR)荧光染料IR-80活体染色后不同的染色效果,探讨最佳实验条件用于良、恶性乳腺细胞的鉴别.方法将人乳腺癌细胞株MCF-7、MDA-MB231和人乳腺上皮细胞株MCF-10A与5、2.5、1.25、0.625 μmol/L浓度的NIR荧光染料IR-80在37℃下共同孵育30 min,缓冲液清洗后,应用激光共聚焦显微镜观察乳腺癌细胞和乳腺上皮细胞在500 ms、1 s和2 s曝光条件下荧光强度.结果当曝光时间一定时,随着IR-80染料应用液浓度的降低,每种细胞系NIR荧光强度逐渐降低;当IR-80染料应用液浓度一定时,随着曝光时间的增加,NIR荧光强度有所增强,但不明显;同样浓度和曝光时间下观察,乳腺癌细胞系(MCF-7、MDA-MB231)荧光染色强度高于人乳腺上皮细胞系(MCF-10A).当IR-80应用液浓度为1.25 μmol/L时,不同曝光条件下,乳腺癌细胞系NIR荧光染色强度明显高于乳腺上皮细胞系,而乳腺上皮细胞系不发荧光.结论七甲川花菁染料IR-80活体染色时,乳腺癌细胞荧光强度明显高于乳腺上皮细胞,当IR-80染料应用浓度为1.25 μmol/L,曝光时间为1 s可鉴别乳腺良、恶性细胞,其有望成为鉴别临床乳腺穿刺标本和手术新鲜组织标本良、恶性的新方法.