换一批长链非编码RNA-AP000344.3对人膀胱癌细胞增殖和侵袭的影响及机制
Effect of long-chain non-coding RNA AP000344. 3 on the proliferation and invasion of human bladder cancer cells and its mechanism
摘要目的 探讨特异性长链非编码RNA-AP000344.3对膀胱癌细胞增殖和侵袭的影响及其作用机制.方法 采用qRT-PCR检测膀胱癌细胞和正常膀胱上皮细胞中AP000344.3的表达,选取表达量最低的癌细胞株进行后续实验.采用Lipofectamine2000转染试剂将AP000344.3质粒或阴性对照质粒转入膀胱癌细胞中,qRT-PCR检测AP000344.3的转染效率.MTT法检测细胞的增殖活性,Transwell实验检测细胞的侵袭能力.生物信息学预测AP000344.3的下游miRNA和下游基因.qRT-PCR和Western blot法检测下游基因的表达.结果 膀胱癌细胞中AP000344.3的表达显著低于正常膀胱上皮细胞(P < 0.01), BIU87细胞中表达最低(P < 0.01).AP000344.3转染48 h后BIU87细胞AP000344.3表达上调(P < 0.01).BIU87细胞增殖活性降低(P < 0.05),细胞侵袭能力降低(P < 0.05).AP000344.3可靶向结合miR-135a-5p,miR-135a-5p可靶向结合CMTM3.AP000344.3表达上调后,miR-135a-5p表达下调(P < 0.01),CMTM3 mRNA和蛋白表达上调(P < 0.01).结论 AP000344.3在膀胱癌细胞中明显低表达,AP000344.3上调可抑制膀胱癌细胞增殖和侵袭,其作用机制可能是抑制miR-135a-5p的表达进而上调CMTM3蛋白的表达,为寻找膀胱癌新的治疗靶点提供理论依据.
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