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水动力尾静脉注射介导Akt/β-catenin/Yap质粒转染建立小鼠肝癌模型

Establishment of a mouse liver cancer model through hydrodynamic tail vein injection-mediated Akt/β-catenin/Yap plasmid transfection

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摘要目的通过应用水动力尾静脉注射(hydrodynamic tail vein injection,HTVi) Sleeping Beauty(SB)质粒及促癌基因质粒,构建一种新型小鼠肝癌模型.方法 6周龄雄性C57BL/6J小鼠,按照体重随机分为对照组和模型组.将冻存的SB、Akt、β-catenin、Yap质粒转化入感受态E.coli DH5α大肠杆菌,于LB培养基扩增后提取质粒.每只模型组小鼠尾静脉快速注射上述质粒混合溶液2 mL,包含SB质粒5μg,Akt、β-catenin、Yap质粒分别15 μg,对照组小鼠给予等量PBS尾静脉注射.继续饲养8周后处死小鼠,观察小鼠情况,记录体重、肝重.观察小鼠肝脏病理学变化,并应用Western blot法检测小鼠肝组织中Akt、β-catenin、Yap基因表达水平.结果高压注射质粒8周后,对照组小鼠活动度好,皮毛光亮;小鼠肝脏形态正常;肝组织HE染色显示,对照组小鼠肝小叶结构完整.模型组小鼠活动减少,皮毛无光泽.与对照组比较,模型组小鼠体重下降、肝重增加、肝体比显著上调;模型组小鼠肝脏体积增大,质地较硬,表面出现颗粒状、结节样改变;肝组织HE染色显示,模型组小鼠肝组织结构紊乱,并出现多个肿瘤结节.此外,与对照组相比,模型组小鼠肝组织中Akt、β-catenin、Yap基因表达均明显上调.结论应用水动力尾静脉注射SB质粒及Akt/β-catenin/Yap质粒的方法可成功建立小鼠肝癌模型,为肝癌发病机制及药物研发提供快速、经济的动物模型.

作者蒋雨薇 ^[1] 宋海燕 ^[2] 李怡萍 ^[1] 汤凯悦 ^[1] 徐娇雅 ^[1] SULAIMAN Andrew ^[3] MCGARRY Sarah ^[4] WANG Lisheng ^[4] 郑培永 ^[2] 学术成果认领

作者单位上海中医药大学附属龙华医院脾胃病研究所,上海200032 ^[1] 上海中医药大学附属龙华医院脾胃病研究所,上海200032;中加联合脾胃病研究中心,上海200032 ^[2] 中加联合脾胃病研究中心,上海200032 ^[3] 中加联合脾胃病研究中心,上海200032;Department of Biochemistry, Microbiology and Immunology,University of Ottawa, Ottawa, ON K1H8M5, Canada ^[4]

关键词肝肿瘤动物模型水动力尾静脉注射 SB质粒癌基因

分类号 R735.2（消化系肿瘤）

栏目名称

论著

DOI 10.13315/j.cnki.cjcep.2020.10.011

发布时间 2021-01-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

基金项目

:上海市中医药新型交叉学科资助计划