换一批GKN2在胃癌细胞增殖、转移中的作用及机制
Role and mechanism of GKN2 in gastric cancer cell proliferation and metastasis
摘要目的 探讨胃动蛋白2(gastrokine 2,GKN2)对胃癌细胞的生长增殖、侵袭、转移的影响及分子机制.方法 利用qRT-pCR和Western blot法检测GKN2在胃癌组织中的表达;构建对照细胞株AGS-CON、SGC-7901-CON与GKN2过表达细胞株AGS-GKN2、SGC-7901-GKN2,应用qRT-pCR和Western blot法检测GKN2在各细胞株中的表达变化,RTCA系统和克隆形成实验检测细胞增殖功能,Transwell及划痕实验检测细胞迁移和侵袭功能,并通过Western blot观察GKN2表达变化对PI3K/AKT/PTEN/mTOR信号通路相关蛋白的作用.结果 GKN2在胃癌组织及多株胃癌细胞株中的表达明显低于癌旁组织和正常胃上皮细胞;RTCA系统显示GKN2过表达组的增殖活性明显低于对照组;克隆形成实验结果 显示,GKN2过表达组的细胞克隆数和大小明显低于对照组;Transwell及划痕实验结果 表明,GKN2过表达组纵向迁移/侵袭数和横向迁移数明显低于对照组.Western blot结果 显示,GKN2过表达下调增殖相关蛋白PCNA、Survivin,抗凋亡蛋白BCL-2及转移相关蛋白MMP-7、MMP-9和MMP-2表达水平,而上调Timp2表达水平.Western blot结果 亦显示,GKN2影响PI3K/AKT/PTEN/mTOR通路的激活水平,特别是明显上调PTEN的表达.结论 GKN2在胃癌组织及多株胃癌细胞株中呈低表达或表达丢失.GKN2影响胃癌细胞的增殖和转移,可能通过PI3K/AKT/PTEN/mTOR通路促进胃癌的发生、发展.
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