伊立替康对食管癌细胞放射增敏作用及核因子κB活性的影响研究

Influence of irinotecan on radiation sensitization and the activity of nuclear factor κB of esophageal cancer cells

摘要:

目的 探讨伊立替康(CPT-11)对食管癌EC109细胞的放射增敏作用及核因子(NF)κB活性的影响.方法 采用MTT法观察不同浓度CPT-11(20、50、100、200μmol/L)作用24、48及72 h后的细胞存活率以筛选低细胞毒性药物浓度进行后续实验;根据实验设计分为对照组、单纯照射组和CPT-11+照射组,采用克隆形成实验检测经不同剂量X线(0、2、4、6、8和10 Gy)的存活分数(SF)并通过单击多靶模型拟合细胞存活曲线计算增敏比(SER),采用流式细胞技术检测各组处理48 h后的凋亡率和caspase-3活化率,Foci焦点形成实验检测各组的DNA损伤情况,Western blotting检测各组NF-κB p65和IκB-α的蛋白水平,实时定量PCR(qPCR)检测各组的Rad51水平.结果 在20~200μmol/L范围内,随CPT-11浓度增加,EC109细胞的增殖抑制率升高,抑制效应呈浓度和时间依赖方式,差异有统计学意义(P<0.05).选取与CPT-1120%抑制浓度(IC20)接近的浓度(25μmol/L)进行增敏实验.CPT-11+照射组的SF低于单纯照射组,且CPT-11+照射组的D0为1.39±0.14,单纯照射组的D0为2.46±0.17,SER为1.77.与对照组和单纯照射组比较,CPT-11+照射组的凋亡率、caspase-3活化率及Foci焦点数目均升高,而Rad51水平降低,差异有统计学意义(P<0.05).CPT-11+照射组的NF-κB p65水平低于其余两组,且IκB-α水平高于其余两组(P<0.05).结论 CPT-11可抑制食管癌EC109细胞增殖并具有放射增敏作用,同时诱导凋亡,可能与抑制NF-κB途径有关.

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