miR-143对肾癌GRC-1细胞增殖与凋亡及其靶点HIF-1α的影响

Effects of miR-143 on proliferation and apoptosis of renal cell carcinoma GRC-1 cells and its target HIF-1α

摘要:

目的 探讨miR-143对肾癌GRC-1细胞增殖凋亡及其靶点缺氧诱导因子1α(HIF-1α)的影响.方法 转染miR-143的模拟物于肾癌细胞株GRC-1细胞,采用实时定量PCR(qPCR)法检测转染的效果,根据实验将GRC-1细胞分为3组:未转染组、miR-143对照组和miR-143转染组,采用MTT法检测各组细胞的增殖情况,流式细胞术检测各组细胞凋亡情况;qPCR及Western blotting检测各组细胞的HIF-1αmRNA和蛋白水平;双荧光素酶报告基因实验验证miR-143与HIF-1α基因间的靶向关系.结果 miR-143转染组的miR-143水平高于未转染组和miR-143对照组,差异有统计学意义(P<0.05);与其余两组比较,miR-143转染组的增殖率降低而凋亡率升高,差异有统计学意义(P<0.05);瞬时过表达miR-143可降低GRC-1细胞的HIF-1αmRNA和蛋白水平(P<0.01),双荧光素酶报告基因实验证明HIF-1α是miR-143的直接作用靶点.结论 miR-143可以调控肾癌GRC-1细胞的增殖凋亡,而HIF-1α是miR-143的直接靶点.

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