miR-21与舌鳞癌SCC9细胞干细胞样特性及顺铂敏感性的实验研究

The effect of miR-21 on the stem cell characteristics of human tongue squamous cell carcinoma and cisplatin sensitivity

摘要:

目的 观察舌鳞癌SCC9细胞干细胞样特性、顺铂敏感性以及miR-21表达对其影响.方法 选取人舌鳞癌SCC9细胞分别通过贴壁、悬浮培养法培养获得SCC9a和SCC9f细胞;体外转染法将miR-21 mimics、miR-21 inhibitor分别转染至SCC9f细胞,设为SCC9m和SCC9i细胞.实时荧光定量PCR(QPCR)法检测干细胞相关转录因子(Oct3/4、Sox2、Nanog)及miR-21表达水平,ALDEFLOR kit检测ALDH阳性细胞的比例.MTT法、Annexin Ⅴ/PI双染法分别检测顺铂对舌鳞癌细胞增殖及凋亡的影响.结果 SCC9f细胞中Oct3/4、Sox2和Nanog表达以及ALDH阳性比例高于SCC9a细胞(P<0.05).顺铂对SCC9f细胞的增殖抑制率、凋亡率均低于SCC9a细胞.miR-21表达在SCC9f细胞中高于SCC9a细胞(P<0.05),而在SCC9m、SCC9i细胞中表达分别较SCC9f细胞明显升高与降低(均P<0.05).Oct3/4、Sox2和Nanog在SCC9m细胞中表达高于SCC9f细胞,其中Oct3/4上调差异具有统计学意义(P<0.001);而Oct3/4、Sox2和Nanog在SCC9i细胞中表达均较SCC9f细胞呈显著下调(P<0.05).SCC9a、SCC9m和SCC9i细胞中ALDH阳性率分别与SCC9f细胞中ALDH阳性率比较,差异均有统计学意义(P<0.05).SCC9m、SCC9i细胞的凋亡率分别较SCC9f减低与增高(均P<0.05).结论 舌鳞癌SCC9细胞采用悬浮培养法培养获得的SCC9f细胞具有干细胞特性,对顺铂更为耐受;抑制miR-21表达可增强SCC9细胞对顺铂的敏感性,可能与miR-21调节其肿瘤干细胞相关转录因子表达有关.

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