微小RNA-96对宫颈癌细胞HeLa增殖凋亡及Spindlin1表达的影响

Effect of microRNA-96 on proliferation, apoptosis and expression of spindlin1 in cervical cancer cell line HeLa

摘要:

目的 探讨微小RNA-96(miR-96)对宫颈癌细胞HeLa增殖凋亡及Spindlin1(SPIN1)表达的影响.方法 采用脂质体法将miR-96模拟物(mimics)及阴性对照分别转染至宫颈癌HeLa细胞(miR-96转染组和miR-96对照组),以未行转染的HeLa细胞为未转染组,实时定量PCR(QPCR)检测各组转染48 h后细胞中miR-96的表达情况,MTT及流式细胞仪分别检测各组转染48 h后的增殖及凋亡情况,分别采用QPCR和Western blotting检测转染48 h后各组细胞的SPIN1 mRNA和蛋白水平,通过双荧光素酶靶标实验验证miR-96与SPIN1之间的关系.结果 转染48 h后未转染组、miR-96对照组和miR-96转染组的miR-96水平依次为1.068±0.053、1.175±0.084和2.434±0.088,miR-96转染组的miR-96水平高于其余两组,差异有统计学意义(P<0.05);未转染组、miR-96对照组和miR-96转染组的增殖率依次为(99.633±5.059)%、(97.727±3.079)%和(62.023±5.425)%,凋亡率依次为(7.515±0.924)%、(8.123±1.247)%和(26.845±4.126)%,与其余两组相比,miR-96转染组的增殖率降低而凋亡率升高,差异有统计学意义(P<0.05);未转染组、miR-96对照组和miR-96转染组的SPIN1 mRNA水平依次为0.965±0.046、0.917±0.044和0.549±0.039,SPIN1蛋白水平依次为0.667±0.042、0.715士0.045和0.384±0.038,miR-96转染组的SPIN1 mRNA和蛋白水平均低于其余两组,差异有统计学意义(P<0.05).miR-96抑制含有野生型SPIN1-3'UTR质粒细胞的荧光素酶活性,却对含有突变型质粒细胞的荧光素酶活性无影响.结论 过表达miR-96可抑制宫颈癌细胞的增殖凋亡并降低SPIN1表达水平,miR-96对SPIN1有靶向调控作用,可作为治疗宫颈癌的有效靶点.

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