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miR-122通过靶向RUNX2诱导胶质瘤细胞凋亡的实验研究

MiR-122 induces apoptosis of glioma cells by targeting RUNX2

摘要:

目的 探讨微小RNA122(miR-122)对神经胶质瘤细胞凋亡的影响及可能分子机制.方法 采用荧光定量PCR(QPCR)检测人正常星形胶质细胞系HA1800和胶质瘤细胞系U251、U87、SHG44、MO59K中miR-122的表达情况.双荧光素酶报告实验评价miR-122对RUNX2的靶向调控作用.向U251细胞转染miR-122 mimics(miR-122组)和阴性对照NC(NC组),流式细胞术检测细胞凋亡,Western blotting检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、cleaved caspase-3的表达.向U251细胞同时转染miR-122 mimics和siRUNX2(miR-122+siRUNX2组),流式细胞术检测细胞凋亡.结果 U251、U87、SHG44、MO59K细胞系中miR-122表达水平分别为0. 34±0. 052、0. 65±0. 061、0. 59±0. 071和0. 69±0. 098,显著低于正常星形胶质细胞系HA1800的1. 17±0. 173,差异具有统计学意义(P<0. 05).miR-122可抑制野生型RUNX2 3'UTR报告基因载体的荧光素酶活性,而对突变型RUNX2 3'UTR-MUT的荧光素酶活性无影响.miR-122组U251细胞凋亡率为(23. 77±0. 83)%,高于NC组的(6. 17±0. 12)%,差异具有统计学意义(P<0. 05);低于miR-122+siRUNX2组的(70. 85±0. 35)%(P<0. 05).Western blotting检测结果显示,miR-122组RUNX2蛋白表达量为0. 57±0. 048,低于NC组的1. 21±0. 19(P<0. 05).与NC组比较,miR-122组Bax(3. 47±0. 077)、cleaved caspase-3(4. 38±0. 121)表达均明显上调,而Bcl-2(0. 39±0. 104)明显下调(P<0. 05).结论 miR-122可以通过靶向RUNX2促进线粒体凋亡通路的激活,促进神经胶质瘤细胞凋亡.

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