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HER-3敲低联合X线辐照对食管鳞癌细胞生物学行为的影响

Knockdown of HER-3 on biological behavior of esophageal squamous carcinoma cells

摘要:

目的 探讨HER-3敲低联合X线辐照对食管鳞癌Eca109和Kyse150细胞增殖、周期和克隆形成的影响及可能机制.方法 慢病毒质粒稳定转染构建HER-3敲低的细胞株(HER-3_sh组),并设空白对照组和阴性对照组.采用实时荧光定量PCR(QPCR)和Western blotting分别检测HER-3的敲低效率,CCK-8和Edu检测HER-3敲低后对Eca109和Kyse150细胞增殖能力的影响,流式细胞仪检测HER-3敲低联合8Gy X线辐照对细胞G2/M期的影响,Western blotting检测G2/M期相关蛋白的表达水平.通过平板克隆实验检测HER-3敲低联合8Gy X线辐照对Eca109和Kyse 150细胞克隆形成的影响.结果 与阴性对照组比较,HER-3_sh组Eca109和Kyse150细胞HER-3 mRNA和蛋白水平均显著降低(P<0.001).CCK-8实验显示,96 h时空白对照组与阴性对照组Eca109和Kyse 150细胞增殖能力的差异无统计学意义(P>0.05);与阴性对照组比较,HER-3_sh组的Eca109和Kyse 150细胞的增殖能力显著降低(P<0.001).Edu实验显示,48 h时空白对照组和阴性对照组Eca109和Kyse150细胞增殖率差异无统计学意义(P>0.05);阴性对照组Eca109和Kyse150细胞的增殖率分别为(41.67±0.7)%和(43.33±1.8)%,高于HER-3_sh组的(21.33±0.8)%和(15.0±1.7)%,差异均有统计学意义(P<0.001).与阴性对照组比较,HER-3_sh组Eca109和Kyse150细胞G2/M期明显阻滞(P<0.01),联合X线辐照后阻滞更显著,同时G2/M期调控蛋白p-Cdc25C和p-Cdc2表达上升,Cyc1in B1表达下降.平板克隆实验显示,HER-3_sh+辐照组细胞克隆形成率显著降低(P<0.05).结论 在食管鳞癌Eca109和Kyse150细胞株中,敲低HER-3会抑制细胞增殖,联合X线辐照会显著增加GJM期细胞阻滞,并降低细胞克隆形成率.

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作者: 朱彩强 [1] 顾俊杰 [1] 张艺璇 [1] 孙新臣 [1] 张姝 [2]
期刊: 《临床肿瘤学杂志》2019年24卷6期 481-486页 ISTICPKUCA
分类号: R735.1
栏目名称: 论著
发布时间: 2019-08-13
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