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长链非编码RNA BCYRN1通过激活Wnt信号通路促进卵巢癌增殖和转移的实验研究

IncRNA BCYRN1 promotes proliferation and metastasis of ovarian cancer by activating Wnt signaling pathway in vitro and in vivo

摘要:

目的 探讨长链非编码RNA脑细胞质RNA1(lncRNA BCYRN1)通过激活Wnt信号通路促进卵巢癌细胞体外及体内增殖和转移的作用.方法 体外培养人卵巢癌SKOV3细胞和腹水瘤亚系SKOV3.ip1细胞(Blank组),采用实时荧光定量PCR(QPCR)检测BCYRN1表达水平.分别向SKOV3.ip1细胞转染BCYRN1-siRNA和阴性对照序列作为BCYRN1-siRNA组和NC-siRNA组.采用CCK-8法、Transwell小室法和划痕实验检测各组细胞增殖、侵袭和迁移活性.采用Western blotting法检测β-catenin、Wnt1、c-myc、Cyclin D1、APC蛋白表达水平.将SKOV3细胞或SKOV3.ip1细胞接种于裸鼠皮下,观察成瘤情况和肿瘤体积;实验结束,处死裸鼠,称重其肿瘤组织,观察其肝脏.结果 SKOV3.ip1细胞BCYRN1表达水平为1.38±0.20,高于SKOV3细胞(P<0.05).BCYRN1-siRNA组BCYRN1表达水平为0.43±0.07,低于Blank组和NC-siRNA组,差异有统计学意义(P<0.05).转染6、12、24、48和72 h后,BCYRN1-siRNA组吸光值(A)分别为0.140±0.027、0.351±0.038、0.548±0.072、0.795±0.103和0.927±0.154,低于Blank组和NC-siRNA组.BCYRN1-siRNA组侵袭细胞数为132±28,迁移细胞数为238±61,48 h划痕愈合率为(45.63±7.12)%,均低于Blank组和NC-siRNA组(P<0.05).BCYRN1-siRNA组β-catenin、Wnt1、c-Myc、Cyclin D1和APC蛋白表达水平分别为0.85±0.17、0.92±0.25、1.10±0.21、0.95±0.20和1.04±0.13,低于Blank组和NC-siRNA组(P<0.05).BCYRN1-siRNA组裸鼠平均瘤体质量为(0.71±0.25)g,低于Blank组(P<0.05),且未见肝转移.结论 BCYRN1在具有高侵袭活性的SKOV3.ip1细胞中表达上调,可通过异常激活Wnt/β-catenin信号,增加卵巢癌细胞的增殖、侵袭和迁移的活性.

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