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微小RNA-1180对肝癌细胞侵袭迁移和TGF-β信号通路的影响

Effect of microRNA-1180 on invasion, migration and TGF-β signaling pathway of hepatoma cells

摘要:

目的 探讨微小RNA-1180( miR-1180)对肝癌细胞侵袭迁移和转化生长因子β( TGF-β)信号通路的影响.方法 采用实时定量PCR(QPCR)检测正常肝上皮细胞LO2和肝癌细胞( MHCC97-H、Huh7、SMMC-7721)的miR-1180水平;常规培养SMMC-7721细胞并采用脂质体介导转染miR-1180抑制物(Inhibitor组)或阴性对照(NC组)并以不行任何处理的细胞为对照组;分别采用MTT比色法、划痕实验和Transwell实验检测miR-1180水平、划痕愈合率和穿膜细胞数,通过生物信息学和双荧光素酶报告基因系统验证miR-1180与分泌型卷曲相关蛋白1(SFRP1)的靶向调控关系;QPCR和Western blotting检测SFRP1、TGF-β1、基质金属蛋白酶( MMP)-3和MMP-9水平.结果 与LO2细胞相比,肝癌细胞的miR-1180水平均升高(P<0. 05).与对照组和NC组相比,Inhibitor组的miR-1180水平及转染48、72 h的增殖活力均降低(P<0. 05). Inhibitor组的划痕愈合率和穿膜细胞数分别为(19. 264± 4. 619)%和(133. 863± 16. 216)个,低于NC组的(67. 579± 7. 734)%和( 316. 906± 25. 753)个及对照组的( 65. 237 ± 5. 621)%和( 326. 815± 28. 946)个,差异有统计学意义( P<0. 05). Inhibitor 组的 TGF-β1、MMP-3和MMP-9水平均低于对照组和NC组(P<0. 05),而SFRP1水平高于对照组和NC组(P<0. 05),而SFRP1水平高于对照组和NC组.对照组和NC组上述指标的差异无统计学意义(P>0. 05). MiR-1180模拟物可降低携带野生型SFRP1 3’端非翻译区载体转染细胞的相对荧光强度(P<0. 05).结论 肝癌细胞中miR-1180高表达,该miRNA可能通过靶向SFRP1来激活TGF-β信号通路,在促进肝癌迁移和侵袭过程中发挥作用,可作为肝癌的一个新且有前景的治疗靶点.

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