长链非编码RNA WDFY3-AS2靶向微小RNA-23b对乳腺癌细胞迁移侵袭的影响
Effects of long non-coding RNA WDFY3-AS2 on migration and invasion of breast cancer cells by targeting microRNA-23b
目的 探讨长链非编码RNA WDFY3反义RNA 2(WDFY3-AS2)通过靶向微小RNA-23b(miR-23b)对乳腺癌细胞迁移和侵袭的影响.方法 采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测正常乳腺上皮细胞(MCF10A)和乳腺癌细胞(MCF7、BT474、MDA-MB-468、BT549)的WDFY3-AS2和miR-23b水平,通过生物信息学预测并结合荧光素酶报告基因实验验证WDFY3-AS2和miR-23b的靶向关系.实验一将BT549细胞分为pcDNA3.1(转染空载体作对照)组和WDFY3-AS2过表达(转染pcDNA3.1-WDFY3-AS2作过表达处理)组,实验二中将BT549细胞分为pcDNA3.1+miR-NC组、WDFY3-AS2过表达+miR-NC组和共过表达(转染pcDNA3.1-WDFY3-AS2+miR-23b模拟物mimics)组.细胞计数法(CCK-8)检测细胞增殖情况,划痕实验和Transwell小室实验评估细胞迁移和侵袭情况.结果 与MCF10A细胞相比,乳腺癌细胞的WDFY3-AS2水平降低而miR-23b水平升高(P<0.05),且miR-23b-5p为WDFY3-AS2的作用靶点.WDFY3-AS2过表达组BT549细胞活力、划痕愈合率、穿膜细胞数量和miR-23b水平较pcDNA3.1组降低(P<0.05).WDFY3-AS2过表达+miR-NC组的细胞活力、划痕愈合率和穿膜细胞数量少于pcDNA3.1+miR-NC组(P<0.05),而共过表达组的上述指标多于WDFY3-AS2过表达+miR-NC组(P<0.05),但与pcDNA3.1+miR-NC组的差异无统计学意义(P>0.05).结论 WDFY3-AS2通过调控miR-23b来抑制乳腺癌的增殖、迁移和侵袭,提示其可能成为乳腺癌的潜在治疗靶点.
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