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促血小板生成素的体外心肌细胞保护作用研究

Protective effect of thrombopoietin on myocardial cells in vitro

摘要:

目的 研究促血小板生成素(thrombopoietin,TPO)对体外心肌细胞的保护作用.方法 建立H9C2细胞株;利用差速贴壁分离法提取新生大鼠原代心肌细胞.用多柔比星诱导H9C2细胞株及原代心肌细胞凋亡,使用TPO干预该过程.采用下列方法研究TPO对体外心肌细胞的保护作用:(1)用甲基噻唑基四唑(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法检测不同TPO浓度下的多柔比星诱导H9C2细胞株凋亡的存活率;(2)动态观察TPO干预前、后24h及48 h的原代心肌细胞集落跳动心率的影响;(3)特异荧光探针JC-1染色H9C2细胞,予流式细胞仪检测其荧光强度,计算各组的凋亡率.结果 (1)MTT法示多柔比星使心肌细胞存活率降至73.8%± 1.09%; TPO浓度50、100 ng/mL作用后的存活率明显提高,分别为84.6%±3.59%、85.6%±4.43%,差异有统计学意义(P<0.05、P<0.01).(2)多柔比星使原代心肌细胞集落第48 h心率降低,明显低于多柔比星+TPO组(TPO浓度为100 ng/mL),差异有统计学意义(15.2%±8.45%vs.47.8%-±11.45%,P<0.01).(3)TPO使由多柔比星诱导的细胞凋亡率明显下降,由17.8%±8.8%降低至11.3%±6.36%,差异有统计学意义(P<0.05).结论 TPO对体外心肌细胞有直接保护作用,其保护作用是通过对抗细胞凋亡或诱导血管形成实现的.

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