换一批
换一批Bmi-1基因表达与人骨髓间充质干细胞增殖关系的探讨
Relationship of Bmi-1 gene expression and human mesenchymal stem cell replication
摘要：
目的:建立人骨髓间充质干细胞(hMSCs)的体外培养体系,研究hMSCs表面抗原的表达情况,以及体外传代培养对Bmi-1基因表达变化的影响,为进一步探讨Bmi-1基因在hMSCs增殖中的作用及调控机制提供依据.方法:骨穿抽取骨髓,以1.077g/ml的Ficoll分离液梯度密度离心,收集单个核细胞进行培养和传代,观察细胞形态和生长周期.取P4代的hMSCs,流式细胞仪检测细胞表面抗原的表达情况.通过SA-β-gal的染色检测细胞的老化程度,通过抽提各代次细胞的RNA,逆转录PCR定量Bmi-1基因量的变化,分析与细胞倍增代数的关系.结果:体外培养的hMSCs贴壁生长,呈长梭形,可增殖形成克隆.经分离纯化培养后,流式细胞仪显示细胞表型为CD13,CD105,少量表达CD33,不表达造血细胞的标志CD34及CD117.SA-β-gal的染色显示随细胞培养时间延长,SA-β-gal染色更明显和清晰.逆转录PCR显示随传代次数的增加,hMSCs的增殖能力逐渐下降,Bmi-1基因表达随培养时间而减少.结论:本培养体系可获得纯度较高的hMSCs,具有强大的增殖能力.Bmi-1基因极可能是影响MSC增殖能力的一个重要基因.
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作者：
作者单位：
南京医科大学第一附属医院神经科,江苏,南京,210029
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南京医科大学药学院,江苏,南京,210029
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南京医科大学附属脑科医院神经科,江苏,南京,210029
[3]
期刊：
《南京医科大学学报（自然科学版）》2008年28卷6期 717-721页
ISTICPKUCSCD
分类号：
R329.28
栏目名称：
基础医学研究
DOI：
10.3969/j.issn.1007-4368.2008.06.006
发布时间：
2008-07-24
基金项目：
南京卫生局基金
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