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大鼠CD90+Lin-骨髓细胞诱导分化为肝细胞过程中Klf4、Nanog基因的表达及启动子区甲基化观察

Expression of Klf4 and Nanog and their promoter methylation during differentiation of rat bone marrow CD90+Lin-cells to hepatocytes

摘要:

目的 观察大鼠CD90+Lin-骨髓细胞诱导分化为肝细胞过程中Klf4、Nanog基因表达及启动子区CpG位点的甲基化变化.方法 大鼠CD90+Lin-骨髓细胞在体外用25 μg/L重组人肝细胞生长因子和0.1 nmol/L地塞米松诱导其分化,在诱导第0、7、14天分别提取细胞DNA和RNA.采用实时荧光定量PCR法检测Klf4、Nanog基因mRNA,甲基化特异性PCR法观察Klf4、Nanog基因启动子区CpG位点甲基化.结果 与诱导第0天比较,第7、14天Klf4 mRNA相对表达量降低(P均<0.05);与诱导第0天比较,第7、14天Nanog mRNA相对表达量均降低(P均<0.05).与诱导第0天比较,诱导第7天Klf4启动子区第1、2个CpG位点甲基化频率升高(P均<0.05);与诱导第7天比较,诱导第14天Klf4启动子区第1个CpG位点甲基化频率升高,第2、3个CpG位点甲基化频率降低,P均<0.05.与诱导第0天比较,诱导第7天Nanog启动子区第1个CpG位点甲基化频率降低,第2个CpG位点甲基化频率升高,P均<0.05;与诱导第7天比较,诱导第14天Nanog启动子区第1个CpG位点甲基化频率升高,第2个CpG位点甲基化频率降低,P均<0.05.结论 大鼠CD90+Lin-骨髓细胞在体外诱导向肝细胞分化过程中,Klf4、Nanog基因表达随诱导时间增加呈现先下降后回升趋势,两者启动子区CpG位点甲基化程度随诱导时间增加出现不同程度变化;Klf4和Nanog基因启动子区CpG位点的甲基化变化不仅会影响Klf4、Nanog基因的表达,而且起到重要的调控作用.

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作者: 刘钦成 [1] 张梓朗 [1] 潘润华 [1] 刘宁 [1] 韩晓玉 [1] 郭凌宏 [1] 王春明 [1] 廖彩仙 [1]
期刊: 《山东医药》2017年57卷31期 13-16页 ISTIC
分类号: R394.2
栏目名称: 论著
DOI: 10.3969/j.issn.1002-266X.2017.31.004
发布时间: 2017-08-31
基金项目:
广东省科技计划项目
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