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美洲斑潜蝇SS-PCR检测技术研究

Species-specific PCR primers for identification of Liriomyza sativae Blanchard

摘要:

[背景]美洲斑潜蝇是一种严重威胁瓜果蔬菜、烟草、棉花等经济作物和花卉生产的入侵性害虫.由于潜叶蝇类害虫体型较小、生活方式隐蔽、形态相似,本文针对其难以快速准确地进行形态鉴别的问题,以美洲斑潜蝇为研究对象,以菜田常见的4种潜叶蝇类害虫为参照,采用种特异性PCR方法(species-specific PCR,SS-PCR),研究其快速分子检测鉴定技术.[方法]调用GenBank中一段936 bp的美洲斑潜蝇线粒体DNA (mtDNA)细胞色素氧化酶亚基Ⅰ基因(COI)的序列(Gen-Bank登录号为EU219613),并根据此基因片段的碱基序列设计引物1对,其扩增片段大小为294 bp.[结果]种特异性检验结果显示,该引物只对美洲斑潜蝇的COI基因具有扩增能力,对其他种类如南美斑潜蝇、三叶斑潜蝇、葱斑潜蝇、豌豆潜叶蝇等没有扩增能力.该引物不仅对成虫具有良好的扩增效果,对蛹、幼虫以及单粒卵也具有同样的扩增效果,其最低检出阈值为1/3840头成虫.[结论与意义]SS-PCR技术体系可用于美洲斑潜蝇的鉴定识别与检测监测,对阻止其进一步扩散蔓延具有重要意义.

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作者: 张桂芬 [1] 刘万学 [1] 郭建英 [1] 吕志创 [1] 万方浩 [1] 申香菊 [2]
第一作者: 张桂芬
作者单位: 中国农业科学院植物保护研究所,植物病虫害生物学国家重点实验室,北京100193;农业部外采入侵生物预防与控制研究中心,北京100081 [1] 北京市顺义区植保植检站,北京,101300 [2]
期刊: 《生物安全学报》2012年21卷1期 74-78页 ISTIC
分类号: S433
栏目名称: 技术前沿
发布时间: 2012-07-24
基金项目:
国家"973"计划项目 国家科技支撑计划项目
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